選擇吸收波長一般包含(不限于)
以下幾種考慮
1、不光考慮目標(biāo)物的最大吸收波長,同時要考慮樣品干擾物吸收值最小的波長。
2、飽和烴類以及其氨基或氰基衍生物是僅有的一類wan全不適合UV檢測的有機(jī)化合物。
3、被特定基團(tuán)(-O-、-OH、-Cl、-COOH、-COOR)取代的飽和烴類具有臨界吸收值,可能需在短波長處(185-210nm)檢測。
4、除上述幾類化合物外,一般化合物都能在較長波長(>210nm)檢測。下表列出各種官能團(tuán)的最大波長與摩爾吸收系數(shù)。
一些常用官能團(tuán)的最大吸收波長與摩爾吸收系數(shù)


5、流動相組分的紫外本底吸收。此項考慮涉及到溶劑的種類選擇、流動相pH選擇以及流動相緩沖鹽選擇等。有些酸有紫外本底,如甲酸,乙酸;有些沒有,如磷酸。這樣,在使用較低波長檢測的方法時,就要考慮使用紫外本底小的酸。冰醋酸在短波長檢測下應(yīng)該慎用。水在180nm以上實(shí)際無吸收,可忽略其影響。正相色譜所用溶劑的吸收度通常更強(qiáng),所以一般需在長波長檢測。
反相流動相組分的UV吸收值與波長的關(guān)系

正相溶劑的UV吸收值與波長的關(guān)系

6、最大吸收波長λmax與化學(xué)結(jié)構(gòu)的關(guān)系。紫外光譜提供了分子中生色團(tuán)和助色團(tuán)的信息,目前雖不能精確計算紫外特征吸收峰,但已總結(jié)出各種經(jīng)驗規(guī)則。最早提出的Woodward(伍德沃德)和Fieser(費(fèi)塞爾)規(guī)則可用來估算二烯烴,多烯烴及共軛烯酮類化合物的最大紫外吸收波長。
多烯烴類與α,β-不飽和酮類紫外吸收的經(jīng)驗規(guī)則
參考資料:
1. 實(shí)用高效液相色譜法的建立[美]L.R.森德爾 J.J.柯克蘭 J.L.格萊吉克 著.張玉奎 王杰 張維冰 譯.
2. 基礎(chǔ)有機(jī)化學(xué)(第三版).刑其毅 裴偉偉 徐瑞秋 裴堅.
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