Dextran-FITC、葡聚糖-熒光素、（葡聚糖-FITC）

CAS NO: 60842-46-8

英文名稱：： Dextran(3,6'dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H],9-[9H]xanthen]-5(or 6]-yl]carbamothioate, average Mw of approximately

分子量：4000, 5000, 6000, 7000, 9000, 10000, 20000, 40000, 70000等等，最高可做到2000k。

溶劑：易溶于水或鹽溶液，也溶于DMSO，甲酰胺和某些其他極性有機溶劑，不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺（DMF)

性狀：黃色固體粉末

穩(wěn)定性：保持密封干燥，冷藏保存，避免反復(fù)凍融。

FITC標記葡聚糖（FITC-Dextran）是以天然葡聚糖B512F限制水解和分級純化制備的不同分子量葡聚糖為底物，經(jīng)熒光素標記所得的合成探針。熒光素基團通過一個穩(wěn)定的硫代氨甲酰健連接到葡聚糖上，此標記步驟不會引起任何的葡聚糖降解。FITC-Dextran內(nèi)每個葡萄糖單位含0.002~0.008 mol FITC，這一低水平的替換確保葡聚糖最小的結(jié)構(gòu)變化，這一特性對滲透性研究來說是最基本需求。

FITC標記葡聚糖（FITC-Dextran）廣泛用于微循環(huán)和細胞通適性研究，通過熒光顯微測定法來檢測。還可用于植物細胞壁多孔性和毛細血管通透性研究。血漿蛋白不會結(jié)合FITC-Dextran。

FITC標記葡聚糖（FITC-Dextran）還可以用于心血管、微循環(huán)、灌注、細胞單層和細胞膜滲適性研究，作為一種熒光流動示蹤化合物，來支持對血流、膜損傷、血管引流和腎清除等過程的測定。FITC-Dextran40可能用于研究細胞內(nèi)吞行為。也可能用于研究內(nèi)皮單細胞層孔隙度和細胞層內(nèi)頂端到基底膜的運動。

本材料是對平均分子量約4kDa葡聚糖進行標記的熒光素衍生物，即異硫 酸熒光素葡聚糖4(fluorescein isothiocyanate dextran 4,FITC-dextran,FD4），以凍干粉形式提供，易溶于水，最大激發(fā)和發(fā)射波長分別為493和520nm。

綜合各種溶液體系和溫度下FITC-Dextrans的穩(wěn)定性測定，總的來說，體內(nèi)外FITC-Dextrans的穩(wěn)定性非常優(yōu)秀。僅當(dāng)pH>9和上升溫度內(nèi)熒光素可能存在水解的風(fēng)險。兔血漿、[**]勻漿液、肝臟勻漿液和尿液內(nèi)的FITC-Dextrans在37°℃，至少3天內(nèi)保持穩(wěn)定，分子量不會發(fā)生變化，且末發(fā)現(xiàn)熒光素基團的釋放。6%三氯yi酸內(nèi)FITC-Dextrans室溫穩(wěn)定保存3天。【文獻來源：P.Kurtzhals,C.Larsen and M.Johansen,High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】

硫代氨甲酰鍵的水解產(chǎn)生4-或5-氨基熒光素，能立即被HPLC定量檢測到。未發(fā)表的研究數(shù)據(jù)顯示，將高壓處理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃長達5個月，發(fā)現(xiàn)僅在50℃情況下可能觀察到微量（1%）的自由氨基熒光素含量增加。單獨進行高壓處理會引起2.7%的自由氨基熒光素產(chǎn)生。

其他的未發(fā)表研究顯示，F(xiàn)ITC-Dextran在pH4溶液35℃內(nèi)能穩(wěn)定保存高達1年。而在pH4，80℃內(nèi)硫代氨甲酰鍵穩(wěn)定30min，可能觀察到葡聚糖的降解。pH9，35℃內(nèi)存放一個月以上會發(fā)生一定量（24%）的熒光衰減。

一些研究證明，F(xiàn)ITC-Dextrans在持續(xù)性實驗（1-6天）的體內(nèi)穩(wěn)定性?！疚墨I來源：N.Thorball,FITC-dextran tracers in microcirculatoryand permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.]