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用什么熒光燈可以看GFP綠色熒光蛋白

來源:上海路陽儀器有限公司   2023年02月02日 13:37  

用什么熒光燈可以看GFP綠色熒光蛋白?

LUYOR-3415RG便攜式雙波長熒光燈可與熒光蛋白觀察眼鏡luv-30A或 luv-50A一起使用直接觀察綠色熒光蛋白(GFP)或紅色熒光蛋白(RFP)。激發(fā)光源與觀察眼鏡LUV-30A共同使用,可在動物設備的固定位置如層流柜直接觀察綠色熒光蛋白(GFP)。LUYOR-3415RG激發(fā)光源使用鋰電池組供電,可與觀察鏡luv-30A 或 luv-50A一起使用直接觀察綠色熒光蛋白(GFP)或黃色熒光蛋白(YFP)。

綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)

 綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)是一類存在于腔腸動物體內的生物發(fā)光蛋白。GFP具有多種優(yōu)點:易于檢測,靈敏度高;熒光性質穩(wěn)定,耐受性強;易于表達,無細胞毒性;可用于活細胞檢測。因此,GFP可作為報告基因用于檢測基因表達或調控,或作為融合標簽來檢測蛋白質分子的定位、遷移、構象變化以及分子間的相互作用,或者靶向標記某些細胞器。


GFP吸收的光譜峰值為395nm(紫外),并有一個峰值為470nm的副吸收峰(藍光);發(fā)射光譜峰值為509nm(綠光),并帶有峰值為540nm的側峰(Shouder)。雖然450~490nm只是GFP的副吸收峰,但由于該激發(fā)光對細胞的傷害更小,因此通常多使用該波段光源(多為488nm)。此外,GFP的光譜特性與熒光素異硫氰酸鹽(FITC)很相似,兩者通常共有一套濾光片。GFP熒光極其穩(wěn)定,在激發(fā)光照射下,GFP抗光漂白(Photobleaching)能力比熒光素強,特別是在450~490nm藍光波長下更穩(wěn)定。


類似的,GFP融合蛋白的熒光靈敏度遠比熒光素標記的熒光抗體高,抗光漂白能力強,因此更適用于定量測定與分析。由于GFP熒光的產(chǎn)生不需要任何外源反應底物,因此GFP作為一種廣泛應用的活體報告蛋白,其作用是任何其它酶類報告蛋白WFBL的。但因為GFP不是酶,熒光信號沒有酶學放大效果,因此GFP靈敏度可能低于某些酶類報告蛋白,比如螢火蟲熒光素酶等。

觀察GFP熒光蛋白方法有:

1.便攜式GFP激發(fā)光源:

采用便攜式GFP激發(fā)光源(又叫熒光蛋白觀測鏡)是zui便捷、zui方便的觀察方法,因GFP在470nm有一個很高的吸收峰,采用  470nm激發(fā)光源能夠激發(fā)GFP發(fā)出明亮的綠色熒光,在觀察gfp熒光時,因為激發(fā)光為強烈的藍色光線,必須佩戴專業(yè)的觀察眼鏡才能觀察到清晰的熒光信號。推薦使用美國路陽LUYOR-3415或LUYOR-3410便攜式激發(fā)光源。

上圖為采用便攜式GFP激發(fā)光源觀察到的效果

2. 紫外光源(紫外熒光燈):

采用紫外光源(又叫紫外線燈、黑光燈)觀察也非常方便,但如果觀察植物,植物葉片的葉綠色在紫外線燈下也會發(fā)出熒光,對gfp發(fā)出的熒光也會產(chǎn)生干擾,另外,標本長時間在紫外光源照射下對GFP標本組織也會造成破壞。

LUYOR-3415RG熒光蛋白激發(fā)光源可野外、實驗室原位測定GFP(綠色熒光蛋白)。通過定點觀察GFP,可有利于學習如何操縱和提高有用的染色體特性,從而可以篩選出高基因表達的植物。

LUYOR-3415RG熒光蛋白激發(fā)光源的應用:

1、 野外、實驗室原位測定GFP(綠色熒光蛋白)。

2、 應用于轉基因作物研究。

3、 區(qū)別可遺傳性改良生物體和不可遺傳的改良生物體。

4、 用于基因表達的研究。

5、 用于Rhodamine(紅色熒光染料)、葉綠素、熒光素的研究。


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