(1)規(guī)格
常見的PCR/qPCR耗材規(guī)格如下
管:0.5 mL, 0.2 mL, 0.1 mL
96 孔板:0.2 mL, 0.1 mL
384 孔板:0.02 mL
PCR/qPCR管/板的規(guī)格決定了反應體積。如果加入過多的樣品,一方面會導致熱傳導的效率下降,另一方面會導致樣品溢出或者污染;如果加入的樣品過少,又會因為頻繁的熱循環(huán)導致水分蒸發(fā),進而導致體系不足、樣品損耗,實驗出現(xiàn)誤差或者無結果。并且選用的耗材需根據(jù)PCR儀的加熱模塊來決定,以求最DA程度的熱傳導的匹配。
(2)高度
PCR/qPCR管/板有不同高度的選擇,其中“低容(low profile)”的管/板意思是說,與普通的管/板相比,它們的高度更低,這樣的設計能最大成大的減少反應體系上方的空間,減少了蒸發(fā)對體系的影響,并且提高了熱傳導的效率。因此更推薦優(yōu)先使用低容的管/板。
(3)厚度
PCR/qPCR管/板要求管壁厚度的一致性,可以保證熱傳導的一致性。除標準厚度外,目前超薄壁的耗材也受到了廣泛的應用,這種超薄壁的管/板管壁厚度約是標準版的50%,可以進一步減少熱障,使熱傳遞進行更快,PCR反應更加穩(wěn)定。
(4)透明度
對于普通PCR來說,管材的透明度對擴增結果無影響。對于qPCR來說,管身應選擇不透明的白色或者磨砂質地的,而管蓋或者密封膜則要求具有高度的光學透性,以保證熒光信號的傳遞最佳,并且降低反應中的失真。
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