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TC含量檢測試劑盒的使用

來源:北京博奧森生物技術(shù)有限公司   2023年02月14日 20:33  
  總膽固醇(TC)含量檢測試劑盒的原理:
 
  TC 包括游離膽固醇和膽固醇酯,TC 是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇 (FC) 和游離脂肪酸 (FFA),從而把膽固醇酯 轉(zhuǎn)化為 FC;進一步利用膽固醇氧化酶催化 FC 氧化,生成△4-膽甾烯酮和 H2O2;最后利用過氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚,生成紅色醌類化合物;在 500nm 有特征吸收峰,其顏色深淺與 TC 含量成正比。
 
  總膽固醇(TC)含量檢測試劑盒操作步驟:
 
  一、TC 的提取:
 
  1、組織中TC 的提取:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:510的比例(建議稱
 
  取約0.1g 組織,加入1mL 試劑一)進行冰浴勻漿,8000g 4℃離心10min,取上清,即
 
  TC待測液。
 
  2、 細胞、細菌中TC 的提取:先收集400-500萬細胞或細菌到離心管內(nèi),棄上清,加1mL
 
  試劑一,超聲波破碎1min(強度20%,超聲2s,停1s),8000g4℃離心10min,取上
 
  清,即TC 待測液。
 
  3、 血清(漿)等樣品:直接測定。
 
  二、測定操作:
 
  1. 分光光度計預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到500nm,蒸餾水調(diào)零。
 
  2. TC 工作液置于37℃水浴30min。
 
  3.標準管:在1mL玻璃比色皿中依次加入50μLTC 標準品和150uLTC 工作液,混勻。
 
  靜置24h 后于500nm處比色,記為A標準管。
 
  4.測定管:在1mL 玻璃比色皿中依次加入50μLTC 待測液和150μLTC 工作液,混勻,
 
  靜置24h后于500nm 處比色,記為A測定管。
 
  注意:標準管只需測定一次。

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