配制Feed4補料培養(yǎng)基必須使用高質(zhì)量的水,如石英玻璃蒸餾器經(jīng)三次蒸餾或超純水凈化裝置制備的水。因為其缺乏了血清中天然成分中和毒素、保護細胞的大分子,既便水中的有毒物質(zhì)含量甚微,也可能對細胞產(chǎn)生致死性損害。這是無血清培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵因素之一。
下面咱們來了解下Feed4補料培養(yǎng)基的使用方法:
1、稱取本品52.2g,加入蒸餾水或去離子水1L,攪拌加熱煮沸至溶解,冷至50℃左右,傾注平皿,待凝固后備用。
2、水樣抽濾。水樣濾完后,再抽氣約5秒,關(guān)上閥門,取下濾器,用滅菌鑷子夾取濾膜邊緣部分,移放在該物質(zhì)上,濾膜截留面向上,濾膜應與其貼緊,兩者間不得留有氣泡。
3、然后將平皿倒置,放入44.5℃隔水式培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)22—24h。如果使用恒溫水浴,則需用塑料平皿,將皿蓋緊,或用防水膠帶貼封每個平皿,將其成疊封入塑料袋內(nèi),浸到44.5℃恒溫水浴里,培養(yǎng)22—26h。
4、觀察結(jié)果。類大腸菌群在此培養(yǎng)基上菌落為藍色,非糞性大腸菌群菌落為灰白色至奶油色。
那么在使用時需要注意些什么事項呢?
1、稱量脫水干粉培養(yǎng)基時避免粉塵揚起,應佩戴口罩操作以免吸入粉塵引起呼吸道系統(tǒng)不適。
2、凝膠培養(yǎng)基如在2~8℃下保存需與存放容器冷凝管保持一定距離以避免結(jié)冰,同時不要存放在冰箱或冷庫風扇直吹的位置以避免把平板吹干。產(chǎn)品多次在低溫與常溫之間變更會引起瓊脂的泌水,屬于正?,F(xiàn)象。使用前應平衡至室溫。
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