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根據(jù)《中國藥典》2020版標準分析人免疫球蛋白類制品IgG單體加二聚體 (KW-803)
《中國藥典》2020版第四部規(guī)定，使用高效液相色譜法分析人免疫球蛋白類制品IgG單體加二聚體，色譜柱要求為：親水硅膠高效體積排阻色譜柱（SEC，排阻極限300 kDa，粒度10 μm) ，柱直徑7.5 mm, 長60 cm（注1）。藥典中要求，人免疫球蛋白對照品單體峰與裂解體峰的分離度應大于1.5（注2），人血白蛋白單體峰與二聚體峰間的分離度應大于1.5，拖尾因子按人血白蛋白單體峰計算應為0.95?1.40。使用PROTEIN KW-803色譜柱進行分析，可以滿足藥典的各種要求。
注1：《中國藥典》2020版規(guī)定，色譜柱的內(nèi)徑與長度，填充劑的形狀、粒徑與粒徑分布、孔徑、表面積、鍵合基團的表面覆蓋度、載體表面基團殘留量，填充的致密與均勻程度等均影響色譜柱的性能，應根據(jù)被分離物質(zhì)的性質(zhì)來選擇合適的色譜柱。
注2：此處滿足的分離度指單體與50~55 k分子量裂解體的分離度。
Sample : 20 µL
(A) Human serum albumin 12 mg/mL
1. Dimer
2. Monomer
Sample : 20 µL
(B) Human IgG 12 mg/mL
3. Monomer
4. Lysate
Column : Shodex PROTEIN KW-803 (8.0 mm I.D. x 300 mm)
Eluent : 0.5 M NaH2PO4 aq./0.5 M Na2HPO4 aq./Isopropanol/H2O=200/420/15.5/914.5
Flow rate : 0.6 mL/min
Detector : UV (280 nm)
Column temp. : 30 ℃
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