多孔細(xì)胞培養(yǎng)板是一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室用品,通過其多孔的表面可以讓細(xì)胞黏附并生長(zhǎng),通常用于細(xì)胞的分離、擴(kuò)增和實(shí)驗(yàn)室研究等方面。
多孔細(xì)胞培養(yǎng)板的作用:
1.可以用于細(xì)胞分離和單克隆細(xì)胞的制備;
2.可以用于細(xì)胞擴(kuò)增和培養(yǎng);
3.可以用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和研究,如細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)化和凋亡等。
多孔細(xì)胞培養(yǎng)板的操作步驟:
1.加樣品:將標(biāo)本稀釋液100ul(或2滴)加到包被板內(nèi)(預(yù)留陰陽(yáng)性及空白對(duì)照2-5孔),將待檢血清用PBS或生理鹽水按1:20稀釋后取10ul加入反應(yīng)孔內(nèi)。
2.加對(duì)照:加入陰性對(duì)照1-3孔,陽(yáng)性對(duì)照1孔,各100ul對(duì)照血清??瞻讓?duì)照1孔空置。
3.溫育:將反應(yīng)板震蕩使樣品混勻后,置37℃溫箱或水浴反應(yīng)20分鐘。
4.洗板:用蒸餾水將濃縮洗滌液15ml稀釋至300ml。(1)手洗:將反應(yīng)板孔內(nèi)容物傾出,將洗滌液注滿反應(yīng)孔,放置30秒鐘后用力甩去,如此重復(fù)5次后拍干。(2)機(jī)洗:5次,每孔注入洗滌液200ul或注滿,停留30秒鐘后吸盡拍干。
5.加酶標(biāo)工作液:每孔加入100ul(或2滴)酶標(biāo)工作液,置37℃溫箱反應(yīng)20分鐘后,洗板5次,洗板操作同步驟4。
6.顯色和終止反應(yīng):將底物A、B液各50ul(或1滴)加到反應(yīng)孔內(nèi),37℃避光顯色10分鐘。每孔加入終止液50ul(或1滴)混勻終止反應(yīng)。
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