在分析基質復雜的樣品時，萃取過程中干擾物質容易同目標化合物一起萃取出來，這些共萃取物干擾分析。通常需采用額外的凈化步驟來對萃取液進行處理，如柱層析法、固相萃取法（SPE）、凝膠色譜法（GPC）等，以減少共萃取物的干擾。復方中藥黃連上清丸基體組成復雜，主要組成藥物17種，《中國藥典（2010版）》對黃連上清丸中的小檗堿提取采用水浴，超聲提取，濃縮提取液后過層析柱去除雜質，該方法操作復雜，耗時耗力。本方法采用In-cell cleanup ASE提取技術對復方中藥黃連上清丸進行提取凈化，取得了滿意的效果。

儀器：ASE 350, 表5-13 ASE萃取條件ASE條件 參數(shù)溶劑 甲醇溫度 140℃加熱時間 7 min靜態(tài)萃取時間 5 min循環(huán)次數(shù) 2吹掃體積 60%吹掃時間 90 s總體積 40 mL總時間 20 min前處理方法：取黃連上清丸水丸1 g，精密稱定，加入硅藻土（DE）適量，研磨，混合均勻。在萃取池（22 mL）中墊入纖維素膜，加入5 g堿性氧化鋁，填平；將混合均勻的樣品加入萃取池中，加速溶劑萃取條件參見表5-13，萃取液定容，濾過，待HPLC分析。

HPLC條件 儀器： Ultimate 3000 HPLC 分析柱：Acclaim 120 C18，5 µm，4.6×250 mm ， P/N：059149；流動相：乙腈-33 mmol/L磷酸二氫鉀溶液（35:65）柱溫：30℃檢測波長：270 nm進樣量：10 µL

結果與討論In-cell cleanup凈化過程參考2010版藥典，采用堿性氧化鋁作為在線凈化吸附劑。取1 g黃連上清丸樣品，分別于萃取池底部添加不同量的堿性氧化鋁，考察堿性氧化鋁的量對凈化效果的影響。實驗結果表明：當不添加堿性氧化鋁萃取時，HPLC分析小檗堿時，小檗堿色譜峰被雜質峰覆蓋，干擾嚴重（見圖5-7、圖5-8）。當堿性氧化鋁添加量達到5 g時，樣品中小檗堿色譜峰未見干擾，采用DAD檢測器進行紫外光譜圖掃描，±50%和100%處三張光譜圖重疊良好，光譜純度因子PPI大于999.0，小檗堿色譜峰沒有雜質干擾。比較未凈化樣品和凈化樣品色譜圖，凈化樣品雜質峰明顯減少（見圖5-9，紅線圈出部分）

ASE和藥典方法比較分別采用ASE在線凈化技術和《中國藥典（2010版）》方法對同一樣品進行萃取，經(jīng)HPLC分析得出結果（表5-14）。采用ASE在線凈化萃取技術提取的樣品中小檗堿含量為0.497 mg/g，標準偏差為2.6%（n=3）；采用《中國藥典（2010版）》方法提取的樣品中小檗堿含量為0.474 mg/g，標準偏差為3.5%（n=3）。采用在線凈化-ASE萃取法和《中國藥典（2010版）》方法對小檗堿的萃取率接近，但在線凈化-ASE萃取法省去了藥典方法中過層析柱，濃縮等步驟，大大簡化了實驗過程，實現(xiàn)了萃取凈化一步到位的目的

結果討論采用In-cell cleanup ASE提取中藥復方黃連上清丸中的小檗堿，和《中國藥典（2010版）》推薦方法對小檗堿的萃取率接近，能夠去除干擾小檗堿測定的雜質，能夠達到萃取凈化一步到位，同時具有操作簡單、快速、高效等特點