小鼠誘導(dǎo)型一氧化合成酶（iNOS）試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

 新橙皮苷二氫查爾酮英文名稱：The new hesperidin chalcone two hydrogenCAS號(hào)：20702-77-6分子式：630.59

 新綠原酸英文名稱：Neochlorogenic acidCAS號(hào)：906-33-2分子式：354.31

 新芒果苷英文名稱：New mangoCAS號(hào)：64809-67-2分子式：584.48022

 雄烯二酮英文名稱：Two ketonesCAS號(hào)：1963/5/8分子式：286.40854

 雪膽素甲英文名稱：Snow gallCAS號(hào)：58546-34-2分子式：562.73

 雪上一枝蒿甲素英文名稱：Bullatine aCAS號(hào)：1354-84-3分子式：343.50292

 雪上一枝蒿乙素英文名稱：Bullatine BCAS號(hào)：466-26-2分子式：437.56956

 血根堿英文名稱：SanguinarineCAS號(hào)：2447-54-3分子式：332.32946

 莪二酮英文名稱：I two ketoneCAS號(hào)：13657-68-6分子式：236.35

 莪術(shù)醇英文名稱：CurcumolCAS號(hào)：4871-97-0分子式：236.34986

 槐角苷英文名稱：SophoricosideCAS號(hào)：152-95-4分子式：432.38

 文多靈英文名稱：Wen DuolingCAS號(hào)：2182-14-1分子式：456.53138

 烏索酸英文名稱：Ursolic acidCAS號(hào)：77-52-1分子式：456.7

 烏藥醚內(nèi)酯英文名稱：LinderaneCAS號(hào)：13476-25-0分子式：260.28514

 吳茱萸次堿英文名稱：Wu Zhuyu baseCAS號(hào)：84-26-4分子式：287.32

 吳茱萸堿英文名稱：EvodiamineCAS號(hào)：518-17-2分子式：303.35778