CHO (Chinese hamster ovary) 細胞是一種常用的哺乳動物細胞,常用于生物制藥領(lǐng)域中的蛋白表達和生產(chǎn)。CHO細胞需要一定的培養(yǎng)基來滿足其生長和生產(chǎn)所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件。
CHO細胞培養(yǎng)基通常包括兩種類型:基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加劑?;A(chǔ)培養(yǎng)基是指基本的成分,包括無菌水、氨基酸、糖類、維生素和無機鹽等。而添加劑則是指特定的成分,可以提高細胞生長和生產(chǎn)的效率和產(chǎn)量。以下是一些常用的CHO細胞培養(yǎng)基和添加劑的介紹。
1. DMEM:Dubelcco's 修改培養(yǎng)基
這是一種常見培養(yǎng)基之一,包括所有基礎(chǔ)成分和大量的添加劑。其中,胎牛血清是常用的添加劑之一,可以提供細胞所需的生長因子和營養(yǎng)物質(zhì)。另外,枸櫞酸(sodium pyruvate)、L-谷氨酰胺(L-glutamine)和其他多種維生素和氨基酸也是DMEM的常見添加劑。
2. FBS:胎牛血清
FBS是一種很重要的CHO細胞培養(yǎng)添加劑,一般添加量為5%-10%。它含有大量的人和動物血清的成分,為細胞提供了多種生長因子和營養(yǎng)物質(zhì)。添加FBS可以讓CHO細胞達到合適的生長和生產(chǎn)狀態(tài)。
3. 常見血清替代物
雖然FBS是一個很好的添加劑,但是有些實驗要求使用無血清培養(yǎng)基,因為FBS可能會引入一些未知的成分或病原體。因此,一些血清替代物被開發(fā)出來,包括動物血清(如馬血清、豬血清、兔血清等)、人類血漿和人工合成的營養(yǎng)物。這些替代物可以提供類似于FBS的生長因子和營養(yǎng)物質(zhì),但是不會包含未知的成分或病原體。
4. 抗生素
抗生素在CHO細胞培養(yǎng)中也是常用的添加劑之一,可以防止細胞感染。常用的抗生素包括青霉素/鏈霉素、慶大霉素和萬古霉素等。
5. 純化劑
一些實驗需要CHO細胞生產(chǎn)純化的蛋白質(zhì),此時需要添加一些純化劑,如L-谷氨酸、酚紅等。
總之,CHO細胞培養(yǎng)基多樣,根據(jù)實驗的需要進行選擇,添加劑的種類和需要的量也不盡相同。通過合理地選擇和組合,可以大限度地提高細胞生長和生產(chǎn)所需蛋白質(zhì)的效率和產(chǎn)量。
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