手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
小鼠骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有多向分化潛能的干細(xì)胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。那么它是如何培育的呢？
1、材料
成年小鼠4只、胎牛血清、L-DMEM、胰蛋白酶、PBS、Percool細(xì)胞分離液、雙抗、8%碳酸氫鈉溶液。
2、儀器
倒置顯微鏡、CO2恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)、生物顯微鏡、低溫高速離心機(jī)、無菌操作臺(tái)、血球計(jì)數(shù)板、6孔培養(yǎng)板。
3、方法
骨髓收集→Percoll密度梯度離心法分離純化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞→貼壁培養(yǎng)→形態(tài)學(xué)觀察→原代培養(yǎng)細(xì)胞
注：原代培養(yǎng)時(shí)胎牛血清比例可適當(dāng)提升，可以提高細(xì)胞成活率。
4、結(jié)果
?。?）骨髓間充質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察
24h后就見有細(xì)胞貼壁，多數(shù)細(xì)胞呈圓形。72h后半量換液去除未貼壁細(xì)胞，此時(shí)貼壁的細(xì)胞為單個(gè)，形態(tài)大部分為圓形。第一次換液后5~7天可見由幾十個(gè)到數(shù)百個(gè)細(xì)胞組成的集落，細(xì)胞形態(tài)呈梭形、三角形、星形。原代培養(yǎng)10天左右，細(xì)胞快速增殖，每個(gè)集落中的細(xì)胞不斷增殖呈長梭形放射狀排列。培養(yǎng)2周左右，每個(gè)小集落形成約數(shù)百至上千個(gè)細(xì)胞的大集落，集落交界處出現(xiàn)重疊、融合。
?。?）骨髓間充質(zhì)細(xì)胞的生長曲線
生長曲線表明BMSCs的增殖能力很強(qiáng)，所測細(xì)胞在開始的前4天里生長緩慢處于潛伏適應(yīng)期，第5天開始迅速增長進(jìn)入對(duì)數(shù)生長期，到第9天細(xì)胞數(shù)輕度上升，第10天達(dá)到頂點(diǎn)，生長速度減緩進(jìn)入平臺(tái)期。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心