細(xì)胞凍存液的分類:
1、滲透性和非滲透性
滲透性保護(hù)劑分子量小可滲透到細(xì)胞內(nèi),如甘油、乙二醇等,非滲透性保護(hù)劑不能滲透到細(xì)胞內(nèi),多為大分子物質(zhì),如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、葡聚糖等。
2、是否含血清
細(xì)胞凍存液含血清是從細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境角度考慮對(duì)細(xì)胞進(jìn)行保護(hù),但含血清(屬動(dòng)物源成分)勢(shì)必需要考慮細(xì)胞污染、批間穩(wěn)定性等因素,另外隨著細(xì)胞治療研究逐漸成為熱點(diǎn),研究及生產(chǎn)過(guò)程的可預(yù)知、可控制要求,胎牛血清的使用液受到限制。
3、是否需要程序降溫
是否需要程序降溫是細(xì)胞凍存中需要考慮的另一個(gè)因素。常規(guī)細(xì)胞凍存液采用培養(yǎng)基+血清+DMSO配置,一般需要采用程序降溫凍存細(xì)胞(先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)(或隔夜),最后才移至液氮罐中進(jìn)行長(zhǎng)期的儲(chǔ)存)。
細(xì)胞凍存液的選擇:
1、細(xì)胞在凍存和溶解過(guò)程中的損傷減低到最小,細(xì)胞存活率高。
2、凍存細(xì)胞復(fù)溫后,其的細(xì)胞生物學(xué)特性無(wú)明顯影響。
3、細(xì)胞復(fù)溫后,低溫保護(hù)劑容易去除,成分清楚,對(duì)細(xì)胞、人體無(wú)毒副作用。
4、凍存保護(hù)劑可快速起效,減少操作步驟。
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