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PCR技術(shù)的各種變體了解一下

來源:上海遠慕生物科技有限公司   2023年04月03日 11:21  

  1.遞減PCR(touchdown PCR):前幾循環(huán)溫度逐漸下降。

  2.逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR):以由mRNA逆轉(zhuǎn)錄而來的DNA為模板,由此產(chǎn)生出來的DNA不帶有內(nèi)含子(基因中不具意義的段落),常應用于分子克隆技術(shù)。

  3.熱啟動PCR(hot start PCR):以高熱活化型核酸聚合酶進行反應,減少非專一性產(chǎn)物。

  4.即時PCR(real-time PCR):PCR過程中利用螢光探針或染料定量檢測,又稱定量PCR(quantitative PCR)。

  5.巢式PCR(nested PCR):先用低特異性引物擴增幾個循環(huán)以增加模板數(shù)量,再用高特異性引物擴增。

  6.多重PCR(multiplex PCR):在同一個管中使用多組引物。

  7.復原條件PCR(reconditioning PCR):PCR產(chǎn)物稀釋10倍后重新放入原濃度的引物和dNTP等循環(huán)3次,以消除產(chǎn)物中的異二聚體。

  8.dsRNA合成(dsRNA replicator):合并使用high-fidelity DNA polymersae、T7RNA聚合酶與Phi6 RNA replicase;從雙股DNA轉(zhuǎn)錄為對應的雙股RNA(dsRNA)??蓱糜赗NAi實驗操作。

  9.COLD-PCR(co-amplification atlowerdenaturation temperature-PCR):用以檢測突變或特殊等位基因的PCR應用技術(shù)。

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