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艾美捷 RmesFect CRISPR轉(zhuǎn)染試劑解決方案

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2023年04月03日 16:50  

基于TEE技術(shù)的艾美捷 RmesFect™ CRISPR轉(zhuǎn)染試劑專為mRNA/gRNA轉(zhuǎn)染而設(shè)計(jì),具有高效率和低毒性的特點(diǎn)。RmesFect™在多種細(xì)胞中都是有效的。

 

OZ Biosciences RmesFect CRISPR轉(zhuǎn)染試劑特點(diǎn):

高效:在所有細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)RNA遞送

即用型:無需額外的緩沖液

低核酸量:毒性最小化

保護(hù) RNA 免受降解

與任何培養(yǎng)基兼容

血清兼容:無需更換培養(yǎng)基

 

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與質(zhì)粒DNA遞送相比,mRNA轉(zhuǎn)染具有以下優(yōu)勢(shì):

無需核吸收。mRNA翻譯成蛋白質(zhì)發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)中。

蛋白表達(dá)速度快于DNA轉(zhuǎn)染

無基因組整合

以完-全啟動(dòng)子非依賴的方式表達(dá)蛋白質(zhì)

 

用于CRISPR Cas9實(shí)驗(yàn)的其他產(chǎn)品:

PolyMag CRISPR用于使用表達(dá)質(zhì)粒進(jìn)行基因組編輯

ProDeliverIN CRISPR用于 Cas9 蛋白遞送

ViroMag CRISPR提高CRISPR/Cas9病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率

 

應(yīng)用:

用于 CRISPR Cas9 基因組編輯實(shí)驗(yàn)

 

開始之前的重要提示:

? 對(duì)于細(xì)胞系,在轉(zhuǎn)染前24小時(shí)將細(xì)胞接種在96孔板、24孔板或6孔板中分別在150µL、400µL和2 mL完-全培養(yǎng)基中培養(yǎng)板。

? 細(xì)胞應(yīng)該是健康的,并在其指數(shù)生長階段進(jìn)行檢測(cè)。出席者污染物(支原體、真菌)將顯著影響轉(zhuǎn)染效率。這個(gè)必須根據(jù)所使用的細(xì)胞和血管來調(diào)整最佳匯合。建議使用定期傳代的細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染。不要使用已經(jīng)培養(yǎng)時(shí)間過長(>2個(gè)月)。

? 讓試劑到達(dá)RT,并在形成復(fù)合物之前輕輕地渦旋它們。

? DNA/RmesFect復(fù)合物必須使用不含血清和補(bǔ)充劑的培養(yǎng)基或緩沖液準(zhǔn)備培養(yǎng)基如MEM、DMEM或OptiMEM或緩沖液如HBS或PBS建議使用。相反,不建議RPMI用于制備復(fù)合物。

? 用去離子水稀釋試劑,稀釋劑量小于1µL,

? 對(duì)于一些細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后24小時(shí)用新鮮的預(yù)熱前培養(yǎng)基代替舊培養(yǎng)基,培養(yǎng)基或僅將新鮮的生長培養(yǎng)基添加到細(xì)胞中。在細(xì)胞非常敏感的情況下轉(zhuǎn)染前,培養(yǎng)基可以在3-4小時(shí)后更換。


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