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PCR技術(shù)中為什么3次循環(huán)才能得到目的基因？
1、第一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增出來(lái)的新片段很長(zhǎng)很長(zhǎng)。
2、第二個(gè)循環(huán)以新的長(zhǎng)片段為模板進(jìn)行，但新片段的一端是引物開頭的，所以第二個(gè)循環(huán)得到的片段就是我們需要的長(zhǎng)度，但只是一條鏈，所以還不能分離出目的基因。
3、第三個(gè)循環(huán)，當(dāng)以第二個(gè)循環(huán)得到的新片段為模板時(shí)，因?yàn)檫@個(gè)片段的長(zhǎng)度就是需要擴(kuò)增的長(zhǎng)度，當(dāng)?shù)谌齻€(gè)循環(huán)完成時(shí)，這個(gè)片段是需要的長(zhǎng)度，且是雙鏈DNA,這就得到了需要的目的基因了。
這三個(gè)熱反應(yīng)過(guò)程的重復(fù)稱為一個(gè)循環(huán),經(jīng)過(guò) 20-40 個(gè)循環(huán)可擴(kuò)增得到
主要由高溫變性,低溫退火和適溫延伸三個(gè)步驟反復(fù)的熱循環(huán)構(gòu)成:即在25~30 次循環(huán)后,模板dna的含量可以擴(kuò)大100萬(wàn)倍以上。
為什么pcr擴(kuò)增目的基因要到第三輪循環(huán)產(chǎn)物中才開始出現(xiàn)兩條脫氧
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