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大腸桿菌專用破菌液,代替超聲破菌

來(lái)源:賽爾瑞成(北京)生命科學(xué)技術(shù)有限公司   2023年04月23日 14:20  

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對(duì)于做重組蛋白原核表達(dá)(大腸桿菌E.coli系統(tǒng))的小伙伴們,破菌是必需的的流程之一,目前用到的通用方法是用超聲儀進(jìn)行超聲破菌。但是如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有超聲儀,或者收集的菌量比較少,就可以選擇賽爾瑞成的大腸桿菌專用破菌液。

大腸桿菌專用破菌液

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1. 節(jié)省成本

只需將菌體與破菌液簡(jiǎn)單混勻,然后凍融即可,不需要超聲儀就能使菌體破碎,釋放可溶上清。節(jié)省儀器成本和人力成本。

2. 組成成分溫和

不含還原劑、強(qiáng)變性劑、離子型去污劑等烈性成分,對(duì)絕大多數(shù)蛋白結(jié)構(gòu)和活性無(wú)影響。

3. 使用搭配靈活

可搭配賽爾瑞成超級(jí)核酸酶(貨號(hào):CR1001),降解菌體裂解后的核酸,以降低破菌液粘度,以利于后續(xù)操作;也可以根據(jù)需要添加蛋白酶抑制劑、還原劑、NaCl等成分。

使用方法

以菌體(g)/化學(xué)破菌液(ml)=1:30(或1:10至1:50之間)比例加入大腸桿菌專用破菌液,打散混勻,置于-20°C以下冰箱,待冷凍結(jié)實(shí)。需要破菌時(shí)取出自然解凍,然后按常規(guī)方法高速冷凍離心,收取破菌上清和菌體沉淀。

數(shù)據(jù)對(duì)比

電泳對(duì)比圖2.png

注: 1:大腸桿菌專用破菌液破菌上清 2:大腸桿菌專用破菌液破菌沉淀

3:超聲破菌破菌上清 4:超聲破菌破菌沉淀

M:蛋白Marker


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搭配賽多培®大腸桿菌高密度表達(dá)培養(yǎng)基,讓重組蛋白原核表達(dá)更簡(jiǎn)單更方便!

多培®大腸桿菌高密度表達(dá)培養(yǎng)基是賽爾瑞成研發(fā)的一種適合于大腸桿菌生長(zhǎng)和蛋白表達(dá)的即用型全成分培養(yǎng)基。使用該培養(yǎng)基,只需一步操作,無(wú)需添加IPTG誘導(dǎo)劑,即可收獲含表達(dá)蛋白的菌體,與常規(guī)方法相比,對(duì)絕大多數(shù)蛋白表達(dá),其菌體生物量和對(duì)應(yīng)的目的蛋白都明顯提高數(shù)倍以上。

賽多培培養(yǎng)基操作流程對(duì)比圖.png




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