基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長(zhǎng)因子。在室溫條件下,基質(zhì)膠聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì),能模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能,有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化。
凝膠制備方法
1)基質(zhì)膠融化后,用預(yù)冷的槍頭混勻基質(zhì)膠。
2)將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,然后將培養(yǎng)的細(xì)胞與基質(zhì)膠混合,用遇冷的槍頭使細(xì)胞懸浮均勻。按照150-200 μL/cm2生長(zhǎng)面積的濃度加入基質(zhì)膠制備3D培養(yǎng)使用的凝膠。
3)在37℃放置30min,此時(shí)即可加入細(xì)胞培養(yǎng)液。
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