serochem PEI轉(zhuǎn)染試劑配制說(shuō)明書
serochem PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種高性能轉(zhuǎn)染試劑,設(shè)計(jì)用于穩(wěn)健、低成本和可擴(kuò)展的瞬時(shí)基因表達(dá)。PEI是HEK293和CHO懸浮培養(yǎng)物瞬時(shí)轉(zhuǎn)染zui chang用的試劑。下面以PEI Prime為例,來(lái)說(shuō)明serochem PEI轉(zhuǎn)染試劑配制。
一、實(shí)驗(yàn)材料:
serochem PEI轉(zhuǎn)染試劑100 mg(Prime-P100-100MG)、100 mL細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)水、10 mL 0.1 M USP級(jí)氫氧化鈉、(0.1或0.2)μm注射器過(guò)濾器、刻度100毫升容器、無(wú)菌等分容器(聚丙烯或聚乙烯)
二、實(shí)驗(yàn)設(shè)備:
分析天平、pH計(jì)、生物安全柜或潔凈室外殼、過(guò)濾設(shè)備(如注射器、真空泵)
三、配制流程:
1. 準(zhǔn)確稱量100 mg PEI Prime,將粉末溶于80mL細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)水中。攪拌幾分鐘來(lái)溶解粉末。
注意:混合后可能會(huì)殘留微量固體。如果存在,將在稍后的步驟中移除,這些不會(huì)影響性能。
2. 逐漸向PEI Prime中加入0.1 M氫氧化鈉溶液,同時(shí)用pH計(jì)監(jiān)測(cè),將pH調(diào)節(jié)至7.0 +/- 0.1,在加入氫氧化鈉之后充分混合。注意:使用少于10ml的氫氧化鈉溶液
3. 添加細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)水,使PEI Prime溶液使總體積達(dá)到100ml。
4. 在無(wú)菌環(huán)境中,如清潔的生物安全機(jī)柜或潔凈室,對(duì)溶液進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾,用(0.1或0.2)μm注射器過(guò)濾器將溶液無(wú)菌過(guò)濾到無(wú)菌儲(chǔ)存容器中。
注意:建議使用PES過(guò)濾膜;尼龍膜也可行。
5. 在4°C的溫度下給容器貼上標(biāo)簽,可儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。
注意:不要冷凍,不要使用冷凍過(guò)一次以上的等分試樣。
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