手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
一、免疫親和柱(Immunoprecipitationcolumn)是一種常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，用于從混合物中分離出特定的蛋白質(zhì)或其他分子。免疫親和柱通過利用抗體與特定分子的相互作用來實(shí)現(xiàn)選通性緩沖。
二、作用過程：
1.制備樣品：將要檢測的生物分子從細(xì)胞提取物、組織或其他樣品中提取出來。這個步驟可能需要不同的方法，具體取決于你感興趣的生物分子。
2.準(zhǔn)備免疫親和柱：選擇一個適當(dāng)?shù)拿庖哂H和柱，然后按照該柱的說明書進(jìn)行準(zhǔn)備。大多數(shù)免疫親和柱都需要在使用前進(jìn)行條件化，并且需要用緩沖液洗滌以去除未結(jié)合的成分。
3.加入樣品：將制備好的樣品加入到免疫親和柱中，使其流過柱。此時，免疫親和柱內(nèi)的抗體將會識別并結(jié)合目標(biāo)蛋白質(zhì)，并將其捕獲到柱內(nèi)。
4.洗滌柱子：用帶有鹽和洗滌劑的緩沖液洗滌柱子，以去除非特異性結(jié)合，并使免疫親和柱上的目標(biāo)蛋白質(zhì)保持其穩(wěn)定性。
5.瞬時沉淀：通過在免疫親和柱中加入一個低pH緩沖液，可以使目標(biāo)蛋白從抗體中釋放出來。此時，目標(biāo)蛋白質(zhì)會形成沉淀，并可用于后續(xù)分析。
6.分析樣品：將瞬時沉淀的樣品用于下一步分析。這可能是Westernblot、質(zhì)譜或其他技術(shù)，具體取決于你要檢測的生物分子。
三、因?yàn)槊庖哂H和柱的高特異性，使用免疫親和柱凈化可以獲得純凈的樣品提取物，如同標(biāo)準(zhǔn)品般純凈的提取物可以用相對簡單常見的檢測方式獲得準(zhǔn)確的定量檢測結(jié)果，這對于微量甚至痕量分析很重要。在樣品凈化過程中，使用親和柱同時避免了常規(guī)液液萃取中大量有機(jī)溶劑的使用，加強(qiáng)了對實(shí)驗(yàn)員的保護(hù)。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心