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離心分離PCR后樣品

來(lái)源:上海旦鼎國(guó)際貿(mào)易有限公司   2023年05月29日 23:32  
用Hitachi CR—G離心機(jī),R10H轉(zhuǎn)頭分離PCR后(DNA或其他生物大分子)樣品
A液:20%PEG6000,2.5M NaCl 及Isopropanol (異丙醇)
 
分離步驟:
1.用384孔板或96孔板,按比例增加容量,在PCR儀中擴(kuò)增反應(yīng)后
2.每孔內(nèi)含10ul PCR后樣品及10ul A液
3.微板先用搖床充分混勻。
4.對(duì)稱加入P10H轉(zhuǎn)頭(二塊或四塊,384孔板)
5.離心10,000rpm(約13,000xg)×10分,4℃,加速“9”,減速“9”
6.取出微孔板
7.用Kimtowels 紙貼在R10轉(zhuǎn)頭放微板架的內(nèi)壁
8.去掉微板蓋并把微板倒過(guò)來(lái)放入R10H 轉(zhuǎn)頭微板架。
9.預(yù)置轉(zhuǎn)速1000rpm,10分,4℃,加速“9”,減速“9”,在速度顯示到達(dá)300rpm時(shí)停車。
10.從微板中取出轉(zhuǎn)頭,沉淀可作出進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。
 
特點(diǎn):1. 轉(zhuǎn)速高(一般微板轉(zhuǎn)頭都在5000rpm,4000xg以下)回收率高。
      2. 沉淀緊,反向低速離心后上清全部被紙吸干。
      3. 用于DNA測(cè)序前樣品制備最合適。

離心機(jī)

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