從營養(yǎng)和安全的角度來看，脂質體具有巨大的營養(yǎng)載體潛力。盡管脂質體具有生物相容性、生物降解性、無毒性和非免疫原性等優(yōu)點，但其較差的理化穩(wěn)定性嚴重限制了其在食品工業(yè)和制藥領域的應用。穩(wěn)定性差的原因：1、磷脂對酯基水解和不飽和酰基鏈氧化引起的磷脂化學降解的高度敏感性，這有助于脂質體膜的結構破壞；2、囊泡融合導致囊泡變大和沉淀，由于脂質降解和/或溫度波動，疏水性生物活性化合物與脂質雙層可能發(fā)生相分離，這也會導致嵌入的生物活性化合物泄漏；3、由于脂質降解和/或溫度波動，疏水性生物活性化合物與脂質雙層可能發(fā)生相分離，這也會導致嵌入的生物活性化合物泄漏。因此，如何降低脂質體對環(huán)境的敏感性并實現(xiàn)脂質體的有效利用仍然值得關注。

與修改脂質體膜組成的繁瑣方案相比，在脂質體表面進行涂層被認為是有效提高其穩(wěn)定性經濟且有效的方法。在眾多涂層材料中，殼聚糖是形成保護性聚電解質層的zui/佳選擇，因為其正電荷容易與帶負電荷的脂質體表面相互作用。

選取低（LCS）、高（HCS）分子量殼聚糖以三種梯度濃度（L：低；M：中等；H：高）包衣的脂質體（Cur-LP）進行穩(wěn)定性評估。

1. 材料和方法   

1.1脂質體的制備  

采用薄膜水合法結合高壓均質法制備Cur-LP，減小了囊泡尺寸，提高了脂質體的均一性。

通過蠕動泵將制備的Cur-LP分散液滴加到低分子量殼聚糖（LCS）和高分子量殼聚糖（HCS）溶液中，體積比為3:5，磁力攪拌60分鐘。滴速為2.5 mL/min?；诿糠N殼聚糖的預設梯度濃度（分別為1、2.5和5mg/mL），在與Cur-LP分散液混合后，殼聚糖的最終濃度被稀釋至0.625、1.563和3.125mg/mL。這三種濃度被稱為低（L）、中（M）和高（H）濃度的殼聚糖。因此，LCS-L（-M，-H）和HCS-L（-M，-H）定義了由低（中、高）濃度的低分子量和高分子量殼聚糖包覆的Cur-LP。將樣品儲存在4°C冰箱中用于進一步分析。

1.2 物理穩(wěn)定性分析  

使用 LUMiSizer®進行測試，轉速：2000 rpm、測試譜線數(shù)量：360，時間間隔：10 s、溫度：25 ℃。以不穩(wěn)定性指數(shù)隨時間變化曲線以表示樣品在測試過程中的失穩(wěn)狀態(tài)，不穩(wěn)定性指數(shù)越高代表體系越不穩(wěn)定，反之乳狀液穩(wěn)定。

2. 結果與分析  

圖1 根據(jù)LUMiSizer測量結果，在25℃下，添加殼聚糖涂層和不添加殼聚糖涂層的Cur-LP的透光率圖譜(A1-A7)和不穩(wěn)定性指數(shù)曲線(B)

使用LUMiSizer進行了囊泡的離心穩(wěn)定性試驗（圖1）。如圖1所示，LUMiSizer透光率曲線的顏色從紅色逐漸變?yōu)榫G色，代表掃描時間的動態(tài)變化。樣品界面處（110mm附近）透光率隨測試的進行逐漸升高，這表明囊泡不斷向樣品管底部遷移。Cur-LP樣品整體透光率增加，表明囊泡在離心作用下快速向樣品管底部遷移，形成沉淀。相反，在有殼聚糖包被的Cur-LP樣品透光率變化明顯降低。樣品管上部和下部之間不同的透光率變化表明囊泡遷移減緩。無論是LCS還是HCS，當殼聚糖濃度增加時，這一現(xiàn)象更為顯著。換言之，殼聚糖涂層和增加濃度都有效地改善了Cur-LP的物理穩(wěn)定性。Tan還發(fā)現(xiàn)，在有殼聚糖涂層的情況下，使用相同的檢測方法，負載有類胡蘿卜素的脂質體穩(wěn)定性有所提高。為了量化穩(wěn)定性差異，確定了不穩(wěn)定性指數(shù)曲線（圖1B）。當殼聚糖濃度較低時，LCS-L囊泡的穩(wěn)定性HCS-L。正如較小的曲線斜率所示，較小尺寸的囊泡比較大的囊泡移動得慢。當殼聚糖濃度增加到中等水平時，相似的斜率表明LCS-M和HCS-M脂質體之間的離心穩(wěn)定性相似。這主要歸因于高分子量的殼聚糖制備的脂質體囊泡之間排斥阻力更強，粘度更高。作為一種兩親性聚電解質，殼聚糖同時具有靜電和粘滯穩(wěn)定機制，在離心作用下減緩了囊泡的移動。此外，殼聚糖的粘度隨著其濃度和分子量的增加而增加，所以HCS-H沉淀速度最慢?？紤]到HCS涂層的Cur-LP具有相對較大的囊泡尺寸，我們得出結論，具有殼聚糖涂層的脂質體的囊泡大小和物理穩(wěn)定性之間存在明顯的聯(lián)系。增加殼聚糖的分子量和濃度可以協(xié)同穩(wěn)定姜黃素脂質體。離心穩(wěn)定性結果與儲存穩(wěn)定性分析的囊泡大小變化結果一致。

3. 結論

增加殼聚糖的分子量和濃度可以有效提高Cur-LP的穩(wěn)定性，其中HCS-H涂層表現(xiàn)出最佳的性能。殼聚糖涂層在體外穩(wěn)定性方面也表現(xiàn)出積極作用，有望用于制造具有更長保質期的脂質體食品，并顯著提高生物活性化合物的生物利用度，如姜黃素的情況所示。

在較高濃度下，高分子量殼聚糖的應用，是一種很有前景的提高Cur-LP體外穩(wěn)定性和緩釋的包覆材料。

LUMiSizer分散體系分析儀，應用STEP技術，對配方穩(wěn)定性分析提供了快捷有效的工具。不僅可以同時檢測12個樣品，而且多波長（近紅外865nm、藍光410nm）覆蓋多品類樣品的測試，為用戶可提供更多更深入的分析信息，極大提高了工作效率。