DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B(DNMT3B)真核蛋白特性

重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,在-80℃條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解,其中溶解的方法非常關(guān)鍵,因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細(xì)注意,這些都是用戶在實際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問題。

(1)原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。Immune tech大腸桿菌表達(dá)的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護(hù)劑,使用過濾后的無菌水作為復(fù)溶劑即可,復(fù)溶凍干蛋白100 μg,用86 μl的超純水,輕輕搖晃使蛋白溶解,再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可溶解,一定不能使用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩或劇烈搖晃。

(2)真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯,還要進(jìn)行翻譯后的加工,使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常,所以重組蛋白必須在真核細(xì)胞中進(jìn)行,如哺乳動物細(xì)胞能夠識別和去除基因中的內(nèi)含子,對翻譯后的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工,這樣表達(dá)的蛋白質(zhì)具有生物活性。我們用溶液態(tài)來保存,保持了其良好的活性和穩(wěn)定性。

(3)類固醇5α還原酶1(SRD5α1)重組蛋白的保護(hù)劑。在凍干和儲存過程中常用的保護(hù)劑或穩(wěn)定劑有糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。我們通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖作為凍干保護(hù)劑。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)改變以及凍干過程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集,也是一種普遍應(yīng)用的凍干保護(hù)劑和填充劑。

綠如藍(lán)核酸染料（UV）（1.5 mL）

綠如藍(lán)核酸染料（可見光型）

溴化乙錠干粉

溴化乙錠清除劑（EB清除劑）

溴化乙錠溶液（1.5 mL）

核酸分子量標(biāo)準(zhǔn)

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)2（DNA marker）（300-5000 bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)2（DNA marker）（50-400 bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker,λDNA/HindIII）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker,φX174 DNA/HaeIII）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker,φX174 DNA/Hinc II）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（100-1500bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（100-2000bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（100-5000bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（100-600bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（200-1500bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（200-5000bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（250-15000bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（300-10000bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（50-500bp）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（pBR322/BstN I）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（pBR322/MspI）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（pUC19/MspI）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（λ-EcoT14 I）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（λ/EcoRI+HindIII）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（λDNA/BstE II）

DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列（DNA marker）（λDNA/EcoR I）