抗原純化的一般方法
抗原物質(zhì)的純化方法很多,下面介紹抗原的一般純化方法。
1. 微生物、類立克次本、類菌質(zhì)體和病毒等抗原的純化
首先應(yīng)分離出純化的株系或毒株,并對(duì)該株系或毒株進(jìn)行生物化學(xué)、血清學(xué)、紫外吸收光譜、電鏡觀察等鑒定,然后將經(jīng)過簽定的純化株系或毒株進(jìn)行生物學(xué)繁殖,在適當(dāng)時(shí)間再將所需株系和毒株提純,得到大量材料,zui后再予以鑒定,并測定其濃度。
在此要特別注意以下幾點(diǎn):1.材料本身是否穩(wěn)定,如果不太穩(wěn)定就要尋找使它穩(wěn)定的條件;2,材料是否容易從寄主中提純,利率是否高,要盡量尋找利率高的提純方法;3,材料本身免疫原性(即抗原性)是否強(qiáng),經(jīng)提純所得材料免疫原性是否損失,要盡量尋找免疫原性強(qiáng)的材料作為抗原,而提純的方法也以不損害材料的生物活性和抗原性為前提。
所以在進(jìn)行微生物等抗原純化的時(shí)候,必須熟悉材料的性質(zhì)、了解材料的繁殖方法和掌握抗原的提純方法,對(duì)工作環(huán)境所具備的提純設(shè)備及其功能的要心中有數(shù)??傊?,不能草率純化微生物等抗原。
2. 動(dòng)植物(包括人體)器官組織內(nèi)的各種蛋白質(zhì)成分(如激素和酶等)作為抗原物質(zhì)的純化
必須解決這些蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復(fù)合體與器官和組織內(nèi)的其他成分的分離,并且要保證所需蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復(fù)合體不因?yàn)樘峒冞^程的處理而變性,影響免疫原性。因此,熟悉所提純蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復(fù)合體的理化性質(zhì),掌握必要的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),是獲得器官組織內(nèi)蛋白質(zhì)抗原的前提。對(duì)于該抗原物質(zhì)也要進(jìn)行純度鑒定,并且要測定濃度。
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