RD蛋白的單位是以小瓶(µg或mg)的方式出售,具有特定的活性范圍。那RD蛋白的生物活性如何測量?
使用生物測定法,例如趨化性或細胞增殖測定法、酶測定法或功能ELISA,常規(guī)測量重組蛋白的生物活性。由于蛋白質(zhì)具有發(fā)揮多種生物活性的能力,對于特定蛋白質(zhì)可能存在幾種可接受的生物測定,并且?guī)追N不同的細胞類型可能會做出反應。不同的細胞類型對特定蛋白質(zhì)具有不同的敏感性。因此,蛋白質(zhì)的活性與細胞類型以及所采用的生物測定有關。
下圖表明,需要不同濃度的重組小鼠IL-6來誘導兩種不同細胞類型的增殖。在生物測定中引發(fā)50%最大反應所需的蛋白質(zhì)質(zhì)量稱為ED50。在這兩種常用的小鼠IL-6測定中,B9雜交瘤細胞系比T1165.85.2.1漿細胞瘤細胞系的靈敏度高約100倍。因此,相同質(zhì)量的IL-6可以被分配為兩個不同的活性單位。
每一批新的蛋白質(zhì)和每一組新的實驗條件都應該在滴定(劑量反應)實驗中進行測試。這需要在建立新的實驗或使用新的蛋白質(zhì)批次或來源時進行。
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