RD蛋白的單位是以小瓶(µg或mg)的方式出售,具有特定的活性范圍。那RD蛋白的生物活性如何測量?
使用生物測定法,例如趨化性或細(xì)胞增殖測定法、酶測定法或功能ELISA,常規(guī)測量重組蛋白的生物活性。由于蛋白質(zhì)具有發(fā)揮多種生物活性的能力,對于特定蛋白質(zhì)可能存在幾種可接受的生物測定,并且?guī)追N不同的細(xì)胞類型可能會做出反應(yīng)。不同的細(xì)胞類型對特定蛋白質(zhì)具有不同的敏感性。因此,蛋白質(zhì)的活性與細(xì)胞類型以及所采用的生物測定有關(guān)。
下圖表明,需要不同濃度的重組小鼠IL-6來誘導(dǎo)兩種不同細(xì)胞類型的增殖。在生物測定中引發(fā)50%最大反應(yīng)所需的蛋白質(zhì)質(zhì)量稱為ED50。在這兩種常用的小鼠IL-6測定中,B9雜交瘤細(xì)胞系比T1165.85.2.1漿細(xì)胞瘤細(xì)胞系的靈敏度高約100倍。因此,相同質(zhì)量的IL-6可以被分配為兩個不同的活性單位。
每一批新的蛋白質(zhì)和每一組新的實(shí)驗(yàn)條件都應(yīng)該在滴定(劑量反應(yīng))實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行測試。這需要在建立新的實(shí)驗(yàn)或使用新的蛋白質(zhì)批次或來源時進(jìn)行。
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