精品推薦 | 僅需5min!高效完成反轉錄實驗
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit是基于Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit開發(fā)的快速逆轉錄試劑盒,適用于PCR擴增以及RT-qPCR實驗。與Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit相比,具有穩(wěn)定的檢出率、特異性、產(chǎn)量保證,且反轉錄總時長最快可低于6分鐘,大大縮短了實驗時間。
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit
※快速反轉:最快5分鐘左右即可完成第一鏈cDNA合成;
※檢出率高:10 pg-1 ug的RNA檢出率;
※高效合成:合成效率媲美進口,最長可合成14kb大小的片段;
※應用廣泛:可用于下游PCR或qPCR,亦可調整引物保證small RNA等樣本的反轉錄;
※示蹤便利:示蹤版包含無干擾、可視化藍色示蹤染料,提醒加樣進度;
※穩(wěn)定性好:試劑盒可4℃存放14天,反轉產(chǎn)物可37℃保存7天,反復凍融50次。
圖. 以293T細胞總RNA為模板,使用11149ES進行逆轉錄,得到的cDNA 進行qPCR 定量分析。結果顯示,不同反轉錄時間處理的Ct值差值在0.2之內。說明產(chǎn)品可在5分鐘內完成反轉錄,反轉效果和長時間反轉效果持平。
圖. 以293T細胞總RNA為模板,使用11149ES進行逆轉錄,得到的cDNA 進行qPCR 定量分析。結果顯示,RNA 投入量為10 pg-1 μg時,11149ES均可反轉成功,保證定量結果。
圖. 以293T細胞總RNA為模板,使用11149ES進行反轉錄,將得到的cDNA進行PCR檢測。結果顯示,11149ES能夠滿足合成1 kb-14 kb長度的cDNA, 后續(xù)PCR有一定的試用場景。若需要直接反轉出10kb以上的片段,建議延長反轉錄時間至20-30分鐘,以保證最終片段的獲取。
圖. 測試顯示,加入一定量的示蹤劑成分,未影響產(chǎn)品的反轉錄效率,Ct值、熔解曲線峰值和TM值未受到負面影響。
圖. 以293T細胞總RNA為模板,使用-20℃、4℃、25℃、37℃下分別儲存1、3、5、7天的11149ES進行逆轉錄,對得到的cDNA 進行qPCR 定量分析。結果顯示,不同溫度不同時間存放的試劑盒定量結果的△Ct均在0.3范圍內(△Ct于±0.5以內,認為兩者差異可忽略不計),具有良好的穩(wěn)定性。
圖. 以293T細胞總RNA為模板,使用11149ES、進口A品牌進行逆轉錄,其中11149ES不進行gDNA去除步驟,將得到的cDNA 進行qPCR 定量分析。結果顯示,進口A品牌反轉時間為13分鐘, 11149ES反轉時間為5分鐘,不同產(chǎn)物定量顯示,11149ES的Ct更小或者接近進口競品,說明11149ES 5分鐘反轉效率優(yōu)于或近似進口A品牌的反轉錄效率。
圖. 以293T細胞總RNA為模板,使用11149ES、進口B品牌進行逆轉錄,其中11149ES不進行gDNA去除步驟,得到的cDNA 進行qPCR 定量分析。結果顯示,進口B品牌反轉時間為20分鐘,11149ES反轉時間為5分鐘,不同量底物定量顯示,11149ES的Ct更小或者接近進口B品牌,說明11149ES 5分鐘反轉效率優(yōu)于或近似進口B品牌的反轉錄效率。
樣本來源:菊花葉片
客戶評價:與某進口品牌效果相似,擴增常規(guī)大小的片段效果不錯。
樣本來源:果*葉片
客戶評價:藍色很好看
樣本來源:水稻
客戶評價:與其他反轉錄試劑盒相比,節(jié)省加樣時間,節(jié)省反轉錄反應時間(其他試劑盒需要15+2 min,本試劑盒只需5 min),后續(xù)基因克隆DNA電泳結果證明,本試劑盒反轉效率更高,條帶更亮,所以會更節(jié)省PCR使用試劑,節(jié)省成本。
方法 | 分類 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 |
qPCR染料法 | 高靈敏通用型定量預混液(染料法) | Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix | 11184ES |
定量預混液 (染料法),已發(fā)文章累計IF達到5000+ | Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) | 11201ES | |
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) | 11202ES | ||
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) | 11203ES | ||
高靈敏型qPCR預混液(染料法) | Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) | 11198ES | |
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) | 11199ES | ||
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) | 11200ES | ||
miRNA qPCR加A法 | Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix(加A法) | 11171ES | |
miRNA qPCR莖環(huán)法 | Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix(莖環(huán)法) | 11170ES | |
RNA一步法RT-qPCR(染料法) | Hifair® III One Step RT-qPCR SYBR Green Kit | 11143ES | |
細胞直接RT-qPCR(染料法) | Hieff® Fast Cell Direct SYBR Green RT-qPCR Kit | 11172ES | |
反轉錄試劑 | 5 min快速反轉,最長可滿足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游應用PCR/qPCR)New | Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit | 11149ES |
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit(No Dye) | 11150ES | ||
15 min一步完成gDNA去除與反轉錄(下游應用qPCR) | Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR | 11142ES | |
cDNA合成預混液,含gDNA去除(下游應用qPCR)Hot | Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) | 11141ES | |
最長可滿足19.8 kb cDNA合成試劑盒,含gDNA去除(下游應用PCR/qPCR) | Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus) | 11139ES | |
常規(guī)30 min反轉預混液,含gDNA去除(下游應用qPCR) | Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) | 11123ES | |
miRNA反轉錄試劑盒(加A法) | Hifair® miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (加A法) | 11148ES |
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