細胞轉(zhuǎn)染實驗會出現(xiàn)哪些問題,怎么預(yù)防?
轉(zhuǎn)染效率低:這可能是由于細胞狀態(tài)差、轉(zhuǎn)染條件不優(yōu)化、DNA質(zhì)量不佳、抑制劑存在等多種因素導(dǎo)致的。為了提高轉(zhuǎn)染效率,需要仔細優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件,如細胞密度、DNA量和轉(zhuǎn)染時間等。
細胞毒性:轉(zhuǎn)染試劑可能會對細胞產(chǎn)生毒性,導(dǎo)致細胞死亡。因此,在選擇轉(zhuǎn)染試劑時需要選擇對細胞毒性較小的試劑,并在轉(zhuǎn)染過程中盡量減少細胞死亡。
細胞狀態(tài)不佳:細胞狀態(tài)不佳可能會影響轉(zhuǎn)染效率。因此,需要確保細胞處于良好的生長狀態(tài),并在轉(zhuǎn)染前對細胞進行優(yōu)化和篩選。
血清影響:血清中的某些成分可能會影響轉(zhuǎn)染效率。因此,在選擇血清時需要選擇適合于轉(zhuǎn)染的血清,并在轉(zhuǎn)染前將血清優(yōu)化到最佳濃度。
細菌污染:細菌污染可能會影響細胞生長和轉(zhuǎn)染效率。因此,需要在實驗過程中嚴(yán)格控制細菌污染,確保細胞處于無菌環(huán)境中。
華雅推薦Serochem品牌的PEI Prime是以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine,PEI)為載體的基因轉(zhuǎn)染試劑。PEI是在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負電的DNA牢固結(jié)合,并賦予凈陽離子電荷,使DNA進入細胞。PEI Prime是一種高性能轉(zhuǎn)染試劑,利用PEI的特性旨在實現(xiàn)高產(chǎn)量,可重復(fù)性和可擴展的瞬時基因表達。
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