傳統(tǒng)流式、全光譜流式和質(zhì)譜流式有什么不同?
流式最早的時候是從流體力學(xué)發(fā)展而來的。1738年, 瑞士物理學(xué)家、數(shù)學(xué)家丹尼爾·伯努利出版了《流體動力學(xué)》。證實(shí)了流體在重力場中流動時能量守恒的原理。這個原理就是后來廣泛被用于在流式細(xì)胞儀上實(shí)現(xiàn)高速單細(xì)胞液流的基本原理。并在隨后的兩百年時間里不斷的演變發(fā)展。那么你知道傳統(tǒng)流式、全光譜流式和質(zhì)譜流式有什么不同嗎?讓我們一起來看看吧!
一、傳統(tǒng)流式
傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀主要由四部分組成。
分別是流動室和液流系統(tǒng);激光源和光學(xué)系統(tǒng);光電管和檢測系統(tǒng);計算機(jī)和分析系統(tǒng)。
基本外觀如下:
內(nèi)部結(jié)構(gòu)圖大致如下:
二、質(zhì)譜流式
質(zhì)譜技術(shù)早在1906年,J.JThomson在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)帶電荷的離子在電磁場中的運(yùn)動軌跡與它的質(zhì)荷比有關(guān)。并于1912年制造出第一臺質(zhì)譜儀。質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)是在傳統(tǒng)流式和質(zhì)譜技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,它結(jié)合了流式技術(shù)和質(zhì)譜技術(shù),利用質(zhì)譜原理對單細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)檢測的流式技術(shù)。國內(nèi)出現(xiàn)了辰安、譜育等質(zhì)譜流式細(xì)胞儀生產(chǎn)廠家。質(zhì)譜流式細(xì)胞儀有別于傳統(tǒng)流式技術(shù)的基于熒光素進(jìn)行抗體標(biāo)記,它采用的是用金屬標(biāo)簽抗體標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)入質(zhì)譜流式細(xì)胞儀。逐個通過ICP質(zhì)譜檢測裝置,然后標(biāo)記好的細(xì)胞就被分離成單個細(xì)胞并依次進(jìn)入等離子體炬進(jìn)行離子化。然后被送入飛行時間質(zhì)譜。最后對每個細(xì)胞中各種金屬標(biāo)簽進(jìn)行定量檢測。進(jìn)而得知每個細(xì)胞中各目標(biāo)蛋白的含量。由于通過每個離心飛行時間來統(tǒng)計的,跟光譜流式分析wan全不一樣,這就不用進(jìn)行熒光補(bǔ)償了。
三、全光譜流式
全光譜流式跟傳統(tǒng)的流式是比較像的,包括儀器的結(jié)構(gòu)、檢測原理、所使用的熒光染料等原料基本上都一樣。wei一不同的就是,傳統(tǒng)流式是實(shí)時反應(yīng)測試結(jié)果的,由于各濾光片有濾光誤差,多種熒光染料同時檢測時會導(dǎo)致很多熒光遺漏或增加,這樣就需要調(diào)補(bǔ)償。而全光譜流式是事項(xiàng)每個染料上機(jī)一次,形成標(biāo)準(zhǔn),儀器會自動把所有的染料對應(yīng)的熒光光譜組合成一個方案。后面多種染料同時上機(jī)檢測時,儀器通過染料的波形去方案庫里尋找對應(yīng)的方案,然后再把這個方案預(yù)先儲存的波形調(diào)用出來顯示出來。
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