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HEPES在mRNA疫苗中的應(yīng)用

來源:艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司   2023年09月07日 12:16  

輝瑞/BioNTech在新冠mRNA疫苗的生產(chǎn)過程中使用到HEPES,同時審評報告反復(fù)強調(diào)了該輔料的無RNase的關(guān)鍵屬性。

結(jié)合2016年BioNTech發(fā)表LPX-mRNA制劑的文章中mRNA原液中所采用的buffer為HEPES,基本可以推斷BioNTech采用HEPES作為原液中的buffer且已獲批上市的疫苗原液采用HEPES作為緩沖對。

英國帝國理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院傳染病系系主任Robin Shattock是mRNA預(yù)防性疫苗領(lǐng)域的專家,與BioNTech以及PNI等公司都有較為密切的合作。其團隊2021年發(fā)表關(guān)于saRNA體外轉(zhuǎn)錄體系優(yōu)化的文章中,考察篩選了影響saRNA體外轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵影響因素,最終確定了采用40mM濃度的HEPES作為IVT反應(yīng)體系buffer,具有更優(yōu)的體外轉(zhuǎn)錄效果。

四、使用HEPES緩沖體系時的注意事項

1、由于pai嗪基團的存在,當(dāng)HEPES暴露于光線中時,會產(chǎn)生H2O2,這對培養(yǎng)的細(xì)胞或其它有生物活性的物體產(chǎn)生毒性,同時對氧化還原敏感的物質(zhì)不宜共同使用,因此HEPES作為緩沖液的操作應(yīng)盡量在避光條件下進行。

2、HEPES在生化領(lǐng)域常見的使用濃度為10-25mM,當(dāng)濃度低于10mM時緩沖能力較弱,不能起到較好的緩沖效果,當(dāng)濃度較高時對一些細(xì)胞可能具有毒害作用。

艾偉拓長期穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護劑與緩沖鹽,GMP條件生產(chǎn),中美雙報,供注射用,超低內(nèi)毒素,DNase& RNase free,符合國際主流藥典標(biāo)準(zhǔn),助力重組蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒載體疫苗、脂質(zhì)體、單雙抗、抗體偶聯(lián)藥物等生物制劑生產(chǎn)與中外申報!

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