HEPES作為IVT反應(yīng)buffer的相關(guān)研究
mRNA原液中采用HEPES作為buffer可能與前一步RNA聚合酶體外轉(zhuǎn)錄密切相關(guān)。
早在1987年便有研究報道使用HEPES緩沖對用于體外轉(zhuǎn)錄,在該研究中考察了不同反應(yīng)條件下IHNV(感染性造血壞死病毒)的 RNA 聚合酶的體外轉(zhuǎn)錄,研究結(jié)果表明對比Tris,使用HEPES緩沖液可以最大限度地提高體外轉(zhuǎn)錄(IVT)效率。


研究中對緩沖條件的研究表明,HEPES緩沖液刺激的RNA合成量比Tris緩沖液高三倍(圖1 a),最佳濃度的HEPES緩沖液為400mM。
英國帝國理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院傳染病系系主任Robin Shattock是mRNA預(yù)防性疫苗領(lǐng)域的專家,與BioNTech以及PNI等公司都有較為密切的合作。其團隊2021年發(fā)表關(guān)于saRNA體外轉(zhuǎn)錄體系優(yōu)化的文章中,考察篩選了影響saRNA體外轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵影響因素,最終確定了采用40mM濃度的HEPES作為IVT反應(yīng)體系buffer,具有更優(yōu)的體外轉(zhuǎn)錄效果。

2016年BioNTech發(fā)表LPX-mRNA制劑的文章中mRNA原液中所采用的buffer為HEPES。該研究中使用HEPES緩沖液配置1mg/ml的RNA原液,用于進一步制備RNA-LPX。
HEPES作為IVT反應(yīng)體系buffer具有優(yōu)勢,這是我們結(jié)合相關(guān)文獻,推斷BioNTech采用HEPES緩沖對作為mRNA原液buffer的原因。
艾偉拓長期穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護劑與緩沖鹽,GMP條件生產(chǎn),中美雙報,供注射用,超低內(nèi)毒素,DNase& RNase free,符合國際主流藥典標(biāo)準(zhǔn),助力重組蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒載體疫苗、脂質(zhì)體、單雙抗、抗體偶聯(lián)藥物等生物制劑生產(chǎn)與中外申報!
HEPES作為IVT反應(yīng)體系buffer具有優(yōu)勢,這是我們結(jié)合相關(guān)文獻,推斷BioNTech采用HEPES緩沖對作為mRNA原液buffer的原因。
艾偉拓長期穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護劑與緩沖鹽,GMP條件生產(chǎn),中美雙報,供注射用,超低內(nèi)毒素,DNase& RNase free,符合國際主流藥典標(biāo)準(zhǔn),助力重組蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒載體疫苗、脂質(zhì)體、單雙抗、抗體偶聯(lián)藥物等生物制劑生產(chǎn)與中外申報!
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。