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單克隆抗體和多克隆抗體之間的區(qū)別

來源:上??道噬锟萍加邢薰?nbsp;  2023年09月13日 13:54  

抗體是免疫蛋白質,在宿主對病毒、細菌和真菌等感染性病原體的防御中發(fā)揮著基本作用。這些Y型蛋白質的免疫功能是由其結合抗原的能力決定的,抗原是由細胞釋放的或在細胞上發(fā)現的刺激免疫反應的分子。

除了在宿主免疫中的作用,抗體在研究和治療方面也被證明是有價值的。兩種類型的抗體,多克隆抗體和單克隆抗體為研究人員提供了檢測或量化目標抗原的不同方法,主要是由于特異性和親和力的不同。在這篇文章中,我們將更詳細地描述多克隆抗體和單克隆抗體,并考慮每種類型如何用于各種應用。

什么是多克隆抗體?


而多克隆抗體通常是從動物血清中獲得抗體,由于可以受到多種抗原刺激而可與多種抗原表位進行結合,所以為多克隆抗體,簡單來說,多克隆抗體屬于多種單克隆抗體的混合物,但多克隆抗體特異性較低。


如何產生用于研究的多克隆抗體?

為了產生適合研究目的的多克隆抗體,首先必須給實驗室動物注射刺激免疫反應的肽、蛋白質、分子或整個細胞。

一旦宿主的免疫系統(tǒng)產生了針對注射抗原的抗體,就必須從動物的抗血清中收集和純化這些抗體。從動物血清中純化多克隆抗體的一種方法是通過免疫后應用抗原包被磁珠、沉淀或色譜法

在這種基于親和力的純化方法減少了最終多克隆群體中的非特異性抗體后,這些抗體就可以用于基于檢測的方法,如西方印跡法、免疫組化法和酶聯免疫吸附法。

圖片


什么是單克隆抗體?


單克隆抗體是指通過B淋巴細胞與骨髓瘤細胞通過融合的方式獲得,屬于單一的B細胞克隆產生的抗原表位抗體,由于單克隆抗體特異性較高,常被用于治療B細胞淋巴瘤、免疫性溶血性貧血或抗腫瘤。


如何產生用于研究的單克隆抗體?

雜交瘤的產生包括將免疫小鼠的分離脾臟細胞與永生化骨髓瘤細胞融合。然后根據目標抗原的特異性和反應性對產生的雜交瘤的克隆進行篩選和選擇。由于單克隆抗體對單一表位具有高度的特異性,它們可以證明對研究科學家和臨床醫(yī)生都是有用的。

單克隆抗體和多克隆抗體之間的區(qū)別

屬性單克隆抗體多克隆抗體
抗體群體同質性異質性
結合特異性識別目標抗原上的單一表位識別目標抗原上的多個表位
靈敏度蛋白質定量方面靈敏度高對低數量的蛋白質有較高的靈敏度
交叉反應特異性高,交叉反應低存在生物物理多樣性,交叉反應高
生產成本昂貴低廉
來源受刺激的B細胞的單系:交雜瘤受刺激的B細胞的多個系別

單克隆抗體和多克隆抗體的優(yōu)缺點

單克隆抗體的優(yōu)點 

1.不朽的供應:一旦創(chuàng)建了單克隆抗體雜交瘤,就可以產生大量的高度特異性抗體。

2.高度特異:mAb在測定中用作一級抗體或用于檢測組織中的抗原是非常理想的選擇。

3.重現性高:單克隆抗體產生較低背景染色和批次變化,并且具有低交叉反應性。因此,它們提供可重復的結果并確保親和純化的效率。

單克隆抗體的缺點 

1.特異性過高,以致于無法進行跨物種的檢測。

2.與多克隆抗體相比,更易受化學處理造成的抗原表位丟失的影響。

多克隆抗體的優(yōu)點 

1.高親和力:由于抗體的結合點多于一個表位,多克隆抗體可以幫助擴增具有低表達水平的靶蛋白的信號。這使得這些抗體成為免疫沉淀和染色質免疫沉淀的理想選擇。

2.容忍輕微的變化:多克隆相對單克隆抗體來說,對于抗原變化(輕度變性,多態(tài)性,糖基化的異質性)較不敏感。

3.更強的檢測信號:多個表位通常提供更強大的信號,更加容易檢測。

多克隆抗體的缺點

1.易產生批次間差異。

2.產生大量非特異性抗體,可能會在某些應用中產生背景信號。

3.由于具有多個表位,檢測免疫原序列的交叉反應性非常重要。

4.不適用于探測抗原的特定結構域,因為抗血清通常會識別多個結構域。


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