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全能核酸酶(同 Benzonase)應(yīng)用程序說明

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2023年09月20日 16:41  

超級核酸酶是一種通過基因表達(dá)獲得的基因工程重組產(chǎn)物。與苯甲酸酶核酸酶相似,它是粘質(zhì)沙雷氏菌分泌的一種廣譜核酸酶,由兩個(gè)亞基組成,每個(gè)亞基大小為26kDa。它也被稱為非限制性核酸內(nèi)切酶,表現(xiàn)出比DNAI強(qiáng)34倍的活性。它可以有效地切割單鏈和雙鏈DNARNA,消化3-5個(gè)堿基長度的5-單磷酸寡核苷酸(低于雜交極限)。其活性需要Mg2+離子,合適pH范圍為610,優(yōu)選反應(yīng)溫度為37°C。該產(chǎn)品以野生型苯甲酸酶為基礎(chǔ),經(jīng)過基因工程改良,在酵母中表達(dá)和純化。它具有去甲側(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素,并在各種條件下(6M尿素、0.1M鹽酸胍、0.4%Triton X1000.1%SDS、1mM EDTA1mM PMSF、0.4%脫氧膽酸鈉)保持高穩(wěn)定性和消化活性。它被廣泛用作各種科學(xué)研究領(lǐng)域以及疫苗、蛋白質(zhì)和多糖制藥行業(yè)的首-選酶制劑,用于去除樣品或產(chǎn)品中的核酸殘留物,提高樣品純度和產(chǎn)品生物效率。

 

艾美捷全能核酸酶(同 Benzonase

Cat #: C-BSM2907

Size: 25 KU / 50 KU / 100 KU

Storage: -20°C

 

全能核酸酶(同 Benzonase組分:

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酶活性定義

一個(gè)單位(U)的活性被定義為在2.625ml反應(yīng)體系中,在37°CpH 8.0的條件下,在30分鐘的反應(yīng)中引起A260吸收峰改變1.0所需的酶的量(相當(dāng)于將37μg鯡魚精子DNA完-全消化成寡核苷酸)。

 

全能核酸酶(同 Benzonase)應(yīng)用程序:

1.降解各種形式的DNARNA,使其成為在制備疫苗、抗體、細(xì)胞療法和其他生物產(chǎn)品時(shí)去除核酸(DNARNA)污染的最-佳工具,以滿足美國食品藥品監(jiān)督管理局的標(biāo)準(zhǔn),即用于治療的生物制藥中核酸殘留量不超過10 pg/劑。

2.通過降解核酸降低細(xì)胞裂解物的粘度,促進(jìn)溶液過濾/超濾過程,縮短處理時(shí)間,提高病毒、AAV載體和來源于細(xì)胞的包涵體純化過程中沉淀物和上清液的分離效率,提高色譜純化效率,zui終提高產(chǎn)量和產(chǎn)品純度。

3.在生物分析中的應(yīng)用:可用于制備ELISA樣品、色譜法、二維電泳(蛋白質(zhì)圖譜)和蛋白質(zhì)印跡分析,以提高分辨率和樣品回收率。

質(zhì)量控制

蛋白質(zhì)純度檢測:

產(chǎn)品經(jīng)SDS-PAGE檢測,純度≥95%。蛋白酶殘留檢測:

將產(chǎn)品與蛋白質(zhì)底物在37°C下孵育16小時(shí),并使用SDS-PAGE凝膠電泳檢測底物。蛋白質(zhì)底物應(yīng)該沒有顯著變化。

內(nèi)毒素殘留檢測:

內(nèi)毒素殘留量<10 EU/ml

 

備注:

1.在處理RNA樣品時(shí),將其加入不含RNase的試管中。

2.超級核酸酶的有效工作溫度范圍為042°C,最適工作溫度為37℃。酶活性在低溫下可能會降低,但這可以通過添加25倍量的苯甲酸酶核酸酶或延長消化時(shí)間(23小時(shí))來補(bǔ)償。

3.含有大量蛋白質(zhì)、細(xì)胞壁或其他鹽的粗產(chǎn)物可能部分抑制酶活性。在這種情況下,有必要增加酶的劑量。

4.酶活性≥250U/ul。對于小體積制劑,在將酶加入系統(tǒng)之前,可以將其在稀釋緩沖液(20mM Tris-Cl pH 8.0,2mM MgCl2,2mM NaCl)中稀釋至一定濃度。稀釋后的溶液只能在4C下儲存幾天。

5.產(chǎn)物以液體形式提供,并且可以直接加入裂解緩沖液中以供共同使用。

6.為了您的安全和健康,請?jiān)趯?shí)驗(yàn)過程中穿戴實(shí)驗(yàn)服、一次性手套和口罩。

 

該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。


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