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實時熒光定量PCR與普通PCR的不同點敘述

來源:上海撫生實業(yè)有限公司   2023年09月25日 16:41  

     實時熒光定量PCR與普通PCR二者的實驗結(jié)果相同,都能說明生物體外的特殊DNA復(fù)制的整個過程的擴(kuò)增效率和溶解溫度情況。但是二者也有以下不同之處。

1、二者系統(tǒng)組成不同

熒光定量PCR儀比普通的PCR儀多了熒光信號采集系統(tǒng)和計算機(jī)分析處理系統(tǒng)。

2、二者原理不同

熒光定量PCR實時監(jiān)測與DNA結(jié)合的熒光染料激發(fā)的熒光,普通OCR通過檢測插入DNA中核算染料的量來測定PCR最終產(chǎn)物量。

3、二者反應(yīng)要求不同

熒光定量PCR對擴(kuò)增片段有較高的要求,一般為100-300bp,普通PCR可以擴(kuò)增長點的片段。

4、二者應(yīng)用不同

熒光定量PCR主要是用來定量分析和確定基因轉(zhuǎn)錄水平的,普通的PCR儀是做定性分析和擴(kuò)增基因片段,定量PCR儀可以做普通PCR儀的工作,反之不行。

5、二者測量成本不同

定量PCR儀價格較為昂貴,普通的基因擴(kuò)增儀(PCR儀)只能夠定性地分析是否存在目標(biāo)片段。但是價格要低很多,而且運行成本也要低很多。

實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。



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