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DNA提取中各類試劑的作用

來源:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司   2023年09月27日 10:18  

  Tris-HCL:緩沖體系。提供穩(wěn)定pH;

  NaCl:可以降低DNA在水中的溶解度,并且不破壞DNA的結(jié)構(gòu);

  EDTA: Ca2+ Mg2+ 的螯合劑,抑制DNase活性;

  SDS:使蛋白變性,促進(jìn)蛋白質(zhì)和DNA的分離;

  巰基乙醇:抗氧化劑,防止酚氧化成醌,保護(hù)DNA;也有人說可以用來消泡;

  醋酸鉀:鉀離子置換SDS的鈉離子,形成不溶于水的PDS,將大量蛋白同步沉淀下來。

  氯仿:異戊醇:使蛋白變性。氯仿的作用是變性劑、抽提脂溶性物質(zhì);

  異戊醇作用是A.降低表面張力、阻止氣泡的產(chǎn)生;B.有助于分相(使離心后水相、有機(jī)相穩(wěn)定)

  (劇烈震蕩時容易產(chǎn)生氣泡,氣泡會阻止相互間的充分作用);

  異丙醇:沉淀DNA;

  70%乙醇:洗滌DNA;(鹽、蛋白等溶于70%乙醇,而DNA不溶)

  100%乙醇:可以用于沉淀DNA,也可以用于使DNA快速干燥

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