磁珠法提取DNA的實驗步驟與注意事項有什么？

來源：天津益元利康生物科技有限公司 2023年10月11日 10:27

磁珠法核酸純化技術(shù)采用了納米級磁珠微珠，這種磁珠微珠的表面標記了一種對核酸有吸附作用的特定活性官能團，能同核酸發(fā)生吸附反應，從而達到核酸與雜質(zhì)分離的目的，進而獲得純化的核酸。那么磁珠法提取DNA的實驗步驟與注意事項有什么呢？讓我們一起來看看吧！

一、步驟

1、樣本處理：核酸必須從細胞或其他生物物質(zhì)中釋放出來。

（1）植物組織：液氮研磨或在特殊裂解液中電動勻漿；

（2）動物組織：液氮研磨或裂解液中手動/電動勻漿；

（3）血細胞：應用紅細胞裂解液處理；

（4）細胞：胰酶處理或蛋白酶K處理。

2、DNA純化：磁珠提前30min從冰箱拿出平衡。磁珠振蕩混勻，取處理完成的裂解液50μl中加入50μl磁珠懸液，按1:1充分混勻，室溫靜置5min，將懸濁液安放在磁力架上，靜置5min至上清清澈，去上清，用75%乙醇或80%乙醇200μl清洗沉淀（現(xiàn)用現(xiàn)配），旋轉(zhuǎn)ep管靜置30s，棄上清。重復清洗2次，干燥5~10min。

3、DNA溶出：待磁珠無乙醇味，從磁力架上取下ep管，用dH2O或TE溶出DNA，充分混勻，勿用槍頭刮蹭磁珠。靜置2min。再將ep管安放在磁力架上，上清清澈后吸取上清至新的ep管，即可得到DNA溶液。

二、注意事項

1.適用于大多數(shù)動植物組織及培養(yǎng)細胞、全血、尤其適用于微量樣品的DNA提取，但對于裂解液過于粘稠的樣品不適用。