磁珠法提取DNA的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)有什么?
磁珠法核酸純化技術(shù)采用了納米級(jí)磁珠微珠,這種磁珠微珠的表面標(biāo)記了一種對(duì)核酸有吸附作用的特定活性官能團(tuán),能同核酸發(fā)生吸附反應(yīng),從而達(dá)到核酸與雜質(zhì)分離的目的,進(jìn)而獲得純化的核酸。那么磁珠法提取DNA的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)有什么呢?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、步驟
1、樣本處理:核酸必須從細(xì)胞或其他生物物質(zhì)中釋放出來(lái)。
(1)植物組織:液氮研磨或在特殊裂解液中電動(dòng)勻漿;
(2)動(dòng)物組織:液氮研磨或裂解液中手動(dòng)/電動(dòng)勻漿;
(3)血細(xì)胞:應(yīng)用紅細(xì)胞裂解液處理;
(4)細(xì)胞:胰酶處理或蛋白酶K處理。
2、DNA純化:磁珠提前30min從冰箱拿出平衡。磁珠振蕩混勻,取處理完成的裂解液50μl中加入50μl磁珠懸液,按1:1充分混勻,室溫靜置5min,將懸濁液安放在磁力架上,靜置5min至上清清澈,去上清,用75%乙醇或80%乙醇200μl清洗沉淀(現(xiàn)用現(xiàn)配),旋轉(zhuǎn)ep管靜置30s,棄上清。重復(fù)清洗2次,干燥5~10min。
3、DNA溶出:待磁珠無(wú)乙醇味,從磁力架上取下ep管,用dH2O或TE溶出DNA,充分混勻,勿用槍頭刮蹭磁珠。靜置2min。再將ep管安放在磁力架上,上清清澈后吸取上清至新的ep管,即可得到DNA溶液。
二、注意事項(xiàng)
1.適用于大多數(shù)動(dòng)植物組織及培養(yǎng)細(xì)胞、全血、尤其適用于微量樣品的DNA提取,但對(duì)于裂解液過(guò)于粘稠的樣品不適用。
2.樣本處理時(shí)一定要快速,減少與空氣接觸發(fā)生降解;液氮的量也要適當(dāng)。
3.核酸如果不立即使用,則需至少在-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
4.震蕩混勻時(shí)一定要讓磁珠和液體充分接觸,使磁珠更好的吸附DNA。
更多有關(guān)磁珠法提取DNA的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng),請(qǐng)聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司:
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。