異硫氰酸熒光素是流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光中常用的有機(jī)熒光染料/探針之一。它的特點(diǎn)是最大/峰值吸光度為 495nm,發(fā)射波長(zhǎng)為 520nm,熒光素與熒光素之間的相互作用導(dǎo)致能量轉(zhuǎn)移和濃縮時(shí)的自猝滅。
異硫氰酸熒光素染料標(biāo)記分子應(yīng)用:
①電泳分離后的蛋白質(zhì)檢測(cè)
②蛋白質(zhì)和肽的微測(cè)序分析
③使用毛細(xì)管區(qū)帶電泳進(jìn)行分子分析
④生物相互作用中的分子跟蹤和檢測(cè)
⑤細(xì)胞和組織切片中的抗原檢測(cè)
⑥通過標(biāo)記 DNA 片段進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測(cè)
除了因其在水中的溶解性而易于用于偶聯(lián)物制備外,異硫氰酸熒光素還具有明亮的熒光由于偶聯(lián)后的大消光系數(shù)和高量子產(chǎn)率,使其成為許多工藝的優(yōu)選染料。
在流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光顯微術(shù)中,染料與各種抗體(一抗或二抗)結(jié)合,以檢查和研究IL-17免疫缺陷和CD63在腎功能中的作用等狀態(tài)。
作為熒光素的衍生物,異硫氰酸熒光素含有一個(gè)異硫氰酸酯反應(yīng)基團(tuán),這有助于其對(duì)通常存在于生物分子中的動(dòng)漫和巰基基團(tuán)具有反應(yīng)性。
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