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預混or非預混，RNA建庫試劑盒，你pick哪個呢？

來源：翌圣生物科技（上海）股份有限公司   2023年10月20日 17:40  

預混or非預混，RNA建庫試劑盒，你pick哪個呢？

 

RNA測序，又稱為轉(zhuǎn)錄組測序，是高通量測序中應用非常廣泛的組學技術之一。其研究應用有：

  • 不同處理組差異基因表達分析；

  • mRNA表達量的差異研究；

  • mRNA結(jié)構(gòu)上的差異（可變剪接、融合基因、點突變（SNP）。

 

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目前，翌圣生物RNA建庫試劑盒不斷進行升級，試劑盒越來越便捷，快速。

 

圖.翌圣生物RNA建庫試劑盒進化軸

 

目前，RNA建庫試劑盒已經(jīng)進化到預混版建庫試劑盒，試劑組分已經(jīng)簡化，每步操作只加一次試劑即可進行PCR。
 
圖.非預混和預混版建庫試劑盒組分對比
 
預混版建庫試劑盒，在操作上節(jié)省人力時間，而且單次樣本越多，效果越明顯。
 
 
 
 
本次對比的試劑盒為翌圣非預混版建庫試劑盒（12308）和預混版建庫試劑盒（12310）進行操作比對，實驗室，使用8個樣本進行mRNA建庫。
 
圖.實驗對比（12308ES VS 12310ES）
 

 

#操作詳解
 
01
1st cDNA合成

該步驟對片段化后的RNA進行逆轉(zhuǎn)錄，預混版RNA建庫，只需要將1st模塊試劑加入片段化后的RNA即可進行PCR，而非預混RNA建庫試劑盒，需要分開添加1st逆轉(zhuǎn)錄酶和1st逆轉(zhuǎn)錄酶buffer。

02
2nd合成步驟

該步驟承接1st cDNA合成步驟進行二鏈互補鏈合成以及末修、加A等步驟。預混版RNA建庫試劑盒，只需要將完成1st cDNA PCR步驟的試劑拿出，直接加入2nd 合成試劑即可進行下步PCR操作，而非預混RNA建庫試劑盒，需要分開添加2nd合成buffer和酶。

03
接頭連接步驟

該步驟承接2nd二鏈合成步驟，進行后續(xù)接頭連接。預混版RNA建庫試劑盒，只需要加入接頭連接模塊和接頭，即可進行接頭PCR過程，而非預混版RNA建庫試劑盒，需要分開添加連接酶、連接buffer以及接頭。

 

后續(xù)PCR擴增和文庫分選、文庫定量等步驟，操作流程類型，此處不再進行贅述。整體看來，預混版RNA建庫試劑盒，不論是操作時間，還是操作的便捷度上，都有非常大的優(yōu)勢。尤其是在自動化建庫時，這種便捷度，能大大提高自動化效率。
 
心動了嗎？聯(lián)系翌圣體驗預混版建庫試劑盒的樂趣吧！

 

 

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