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新手如何培養(yǎng)細胞?

來源:上海鹿森生物工程有限公司   2023年11月06日 13:52  

細胞培養(yǎng)基本概念:

細胞培養(yǎng)
將活細胞(尤其是分散的細胞)在體外進行培養(yǎng)的方法稱為細胞體外培養(yǎng)。狹義的主要是指分離(散)細胞培養(yǎng),廣義的還包括單(個)細胞培養(yǎng)又稱克隆,是指單個細胞通過有絲分裂形成的細胞群體。


原代細胞
初次培養(yǎng)。即培養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)皿中就不再分割,任其生長繁殖而不更換生長器皿。
 
傳代培養(yǎng)
隨著培養(yǎng)時間的延長、細胞不斷分裂繁殖,細胞之間相互接觸會發(fā)生接觸性抑制,生長速度逐漸減慢甚至停止。培養(yǎng)皿中營養(yǎng)物逐漸不足,代謝產(chǎn)物不斷累積,不利于細胞繼續(xù)生長。在這種情況下,需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接到培養(yǎng)器皿中進行再培養(yǎng)。
 
細胞系
原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代培養(yǎng)后所繁殖的細胞群體。狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞,廣義的是指可傳代的細胞。正常細胞通常只能分裂有限的次數(shù),隨后就會喪失增殖的能力,這是一個由遺傳決定的事件,被稱為衰老。這種細胞系被稱為有限細胞系;一些細胞系會通過轉(zhuǎn)化的過程變?yōu)橛郎约毎?,這一過程可自然發(fā)生,也可經(jīng)化學(xué)或病毒誘導(dǎo)發(fā)生。有限細胞系發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得無限分裂能力后就成為連續(xù)細胞系。

 

細胞培養(yǎng)的環(huán)境:

細胞培養(yǎng)實驗室的主要要求是時時維持細胞培養(yǎng)工作區(qū)域處于無菌狀態(tài),獲得無菌條件的方式就是使用細胞培養(yǎng)超凈臺。
細胞培養(yǎng)超凈臺應(yīng)足夠一人使用,內(nèi)外部均采用易清潔設(shè)計,具有充足的照明,使用舒適。
使用過程中需保持細胞培養(yǎng)超凈臺內(nèi)工作空間整潔有序,將所有物品放在直視范圍內(nèi),便于取用。使用前向放入細胞培養(yǎng)超凈臺內(nèi)的物品噴灑70%的乙醇,擦拭清潔,進行消毒。

細胞培養(yǎng)通超凈臺的物品擺放一般遵循以下右手使用習(xí)慣,可根據(jù)特殊實驗中增加的物品進行相應(yīng)的適當(dāng)改動。

 

超凈臺中部
擺放細胞培養(yǎng)類耗材。耐思細胞培養(yǎng)類耗材除了板、瓶、皿等常規(guī)耗材,更具備高品質(zhì)大規(guī)模生物工藝器皿,規(guī)格全面,型號豐富。

 

超凈臺右前方
擺放移液耗材及器械,便于取用。耐思液體轉(zhuǎn)移類耗材多樣,移液吸頭、離心管、真空過濾器、血清移液管等。

 

超凈臺右后方
擺放生物試劑和培養(yǎng)基,便于吸取。耐思生物試劑類產(chǎn)品包含核酸提取與純化試劑、PCR/RT-PCR相關(guān)試劑、實驗室常規(guī)試劑、基因敲除試劑等。

 

超凈臺中后部
擺放試管架等,用于固定其他試劑。

 

超凈臺左后方
擺放小型容器,用于盛放廢液。


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