在狹義上，結(jié)締組織是指它所包含的三種纖維：膠原纖維、網(wǎng)狀纖維和彈性纖維，其中膠原纖維分布極為廣、含量極為豐富。Masson三色染色被稱為Masson染色法，是結(jié)締組織染色特別經(jīng)-典的方法之一，也是膠原纖維染色的經(jīng)典技術(shù)。術(shù)語(yǔ)“三色染色”通常是指對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色細(xì)胞核，并選擇性地顯示膠原纖維和肌肉纖維。這種方法的染色原理與陰離子染料分子的大小和組織滲透性：較小的分子可以很容易地滲透致密和低滲透性組織，而較大的分子只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)松散和高滲透性組織。然而，苯胺藍(lán)分子量大，因此Masson染色后，肌肉纖維呈現(xiàn)紅色，膠原蛋白纖維呈現(xiàn)綠色（淺綠色）或藍(lán)色（苯胺藍(lán)）。

艾美捷改良Masson三色染色液基本參數(shù)：

目錄號(hào)：A-CSH274

規(guī)格：8×50mL

儲(chǔ)存：在2~8°C的黑暗中儲(chǔ)存（12個(gè)月）

程序：

1.將組織固定在10%福爾馬林固定劑中，然后常規(guī)脫水和包埋。切片被切割成4μm的厚度，然后進(jìn)行常規(guī)的脫蠟直至脫水。

2.將切片置于Bouin溶液中，在室溫下孵育過(guò)夜或置于37°C的培養(yǎng)箱中孵育2小時(shí)進(jìn)行媒介化。然后，用自來(lái)水沖洗切片，直到切片上的黃色消失。

3.切片用天青石藍(lán)染色溶液染色2-3分鐘，然后進(jìn)行短暫的水洗。

4.切片用Mayer蘇木精染色溶液染色2-3分鐘，然后進(jìn)行短暫的水洗。

5.切片在酸-醇分化溶液中分化幾秒鐘，然后用水沖洗10分鐘

6.切片用胭脂紅染色液染色10分鐘，然后用蒸餾水漂洗。

7.將切片用磷鉬酸水合物溶液處理約10分鐘。

8.倒出上清液，在不用水沖洗的情況下，將切片直接用苯胺藍(lán)染色溶液染色5分鐘。

9.將切片用弱酸溶液處理2分鐘。

10.使用95%乙醇進(jìn)行快速脫水。切片在100%乙醇中脫水三次，每次5-10秒。

11.切片在二甲苯中清洗三次，每次清洗1-2分鐘。最后，使用中性安裝介質(zhì)進(jìn)行密封

改良Masson三色染色液供應(yīng)材料和儲(chǔ)存條件：

注：

1.應(yīng)盡可能徹-底地對(duì)各部分進(jìn)行除石蠟處理。酸性醇的分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片的厚度、組織類型及其年齡來(lái)確定。

2.磷鉬酸的作用有兩個(gè)：一方面，它將染紅的膠原纖維區(qū)分為無(wú)色或淡紅色，同時(shí)使肌肉纖維和纖維素仍呈現(xiàn)鮮紅色；另一方面，它作為膠原纖維的媒染劑，促進(jìn)它們與苯胺藍(lán)染色溶液的結(jié)合。

3.苯胺藍(lán)染色后用弱酸溶液處理，目的是去除細(xì)胞質(zhì)中的藍(lán)色，使染色生動(dòng)清晰。對(duì)于用Zenker溶液固定的組織，弱酸溶液的處理時(shí)間可以延長(zhǎng)到5分鐘。

4.弱酸性溶液可提高色彩的清晰度和生動(dòng)性。如果需要大量，可以制備0.1-0.3%的乙酸溶液作為替代品。

該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。