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前言
貓狗糧快遞被針管投毒”？最近，此網(wǎng)傳消息引眾多人關注。很快，消息被辟謠為假，讓不少寵物主人松了口氣。
寵物而今成為越來越多人的陪伴者，寵物用品市場也隨之不斷擴大，對寵物食品、寵物飼料的要求也越來越高。其中，膳食纖維對寵物腸胃功能的保護、促進作用越來越受到重視，許多寵物飼料產(chǎn)品將膳食纖維作為添加營養(yǎng)成分之一。
適當?shù)纳攀忱w維含量對寵物的營養(yǎng)攝入具有利好作用，準確測定產(chǎn)品中的膳食纖維含量，可明確產(chǎn)品的功能性、適用性、質量等。
本方案依照國標《GB 5009.88 食品安全國家標準 食品中膳食纖維的測定》，使用膳食纖維測定儀對寵物飼料中的總膳食纖維含量進行測定。
儀器
DF06膳食纖維測定儀，SOX606索氏提取儀，K1100全自動凱氏定氮儀，分析天平等。
實驗過程
儀器準備
1、將濾膜編號，于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為MG后，安裝于過濾漏斗中，并安裝至儀器相應位置處。
2、移取350 μL的熱穩(wěn)定淀粉酶溶液，溶于盛有50 mL的MES-TRIS緩沖液的酶瓶中；移取3.5 mL的10 mg/mL蛋白酶溶液，溶于盛有47 mL的MES-TRIS緩沖液的酶瓶中；移取700 μL的葡萄糖苷酶溶液，溶解于盛有50 mL的MES-TRIS緩沖液的酶瓶中，然后將酶瓶安裝至儀器相應位置處。
3、將酶解袋裝于儀器相應位置處。
樣品制備
精確稱取混勻后的樣品10~12 g（精確至0.1 mg）左右，記為MC。將稱好的樣品轉移至濾紙筒中。將盛有樣品的濾紙筒置于儀器萃取室內，向溶劑杯中加入沸程30~60℃的石油醚，儀器參數(shù)設置如下：
萃取模式 | 萃取時間 | 萃取溫度 | 試劑添加量 | 預干燥時間 |
索氏標準 | 270 min | 65℃ | 100 mL | 30 min |
抽提完成后，將殘渣烘干至恒重，記為mD。
總膳食纖維測定
準確稱取樣品1.0 g（精確至0.1 mg），記為M，并轉移置酶解袋中。設定酶解程序如下：
酶解 | 時間/min | 溫度/℃ |
淀粉酶酶解 | 40 | 95 |
蛋白酶酶解 | 120 | 60 |
葡萄糖苷酶酶解 | 30 | 60 |
在葡萄糖苷酶酶解開始前，用3 mol/L的醋酸溶液調節(jié)酶解液PH（60℃下）至4.5±0.2（或可先添加5 mL的3 mol/L醋酸溶液后使用1 mol/L的氫氧化鈉溶液調節(jié)至該PH值）。設置沉淀及洗滌參數(shù)如下：
78%酒精沉淀添加量 | 260 mL |
沉淀時間 | 60 min |
抽濾時間 | 3600 s |
78%酒精沖洗用量 | 15 mL |
95%酒精沖洗用量 | 15 mL |
抽濾完成后，將附有殘渣的濾紙取出，放置于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為MGR。
不可溶性膳食纖維及可溶性膳食纖維測定
稱樣量及酶解的參數(shù)與與總膳食纖維測定方法相同，酶解結束后的洗滌參數(shù)設置如下：
抽濾時間 | 360 s |
洗滌熱水用量 | 15 mL |
抽濾完成后，將附有殘渣的濾紙取出，放置于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為MGR。將洗滌后的濾液收集在布氏漏斗下方的錐形瓶中，設置沉淀及洗滌參數(shù)如下：
78%酒精沉淀添加量 | 396 mL |
沉淀時間 | 60 min |
抽濾時間 | 3600 s |
78%酒精沖洗用量 | 15 mL |
95%酒精沖洗用量 | 15 mL |
沉淀完成后，在儀器上換裝另一套裝有恒重好的濾膜的漏斗及燒瓶，將沉淀好的溶液搖勻并倒入新的漏斗中抽濾。抽濾完成后，將附有殘渣的濾紙取出，放置于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為MGR。
計算
每兩份殘渣按照國標GB 5009.5，一份計算蛋白質質量MP；另一份置于馬弗爐中，于550℃下灰化3h測定灰分，計算灰分質量MA。
結果與討論
實驗結果
實驗選取的寵物飼料樣品經(jīng)脫脂、酶解、抽濾、烘干恒重、測定蛋白和灰分后，得到實驗結果如下表所示：
樣品 | 稱樣量/g | 損失因子 | 殘渣/g | 殘渣蛋白質/g | 殘渣灰分/g | 總膳食纖維含量/% | 均值/% | 精密度/% |
寵物飼料 | 1.0010 | 1.199 | 0.3555 | 0.1112 |
| 15.33 | 15.69 | 4.65% |
1.0122 | 0.3709 |
| 0.0652 | |||||
1.0042 | 0.3744 | 0.1181 |
| 16.06 | ||||
1.0050 | 0.3786 |
| 0.0633 | |||||
0.0000 | 0.0083 | 0.0052 |
|
| ||||
0.0000 | 0.0074 |
| 0.0009 |
結論
?
本次測試的寵物飼料的總膳食纖維含量為15.69%，精密度為4.65%，結果平行性良好。
參考文獻
[1] GB 5009.88 食品安全國家標準 食品中膳食纖維的測定[s].
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