上海通蔚給您講解ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)必須掌握的技巧
想必現(xiàn)在很多人都聽(tīng)說(shuō)過(guò)ELISA試劑盒,甚至還有很多人就處在相關(guān)的行業(yè)。而ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技巧你要是能夠掌握,以后做實(shí)驗(yàn)就會(huì)減少失誤,降低了實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)。上海通蔚給大家介紹一下。
ELISA試劑盒17個(gè)相關(guān)操作技巧如下:
1.切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板外表輕拭吸干。
2.合理安排檢丈量,避免反響板過(guò)多形成洗板等候時(shí)刻長(zhǎng)。
3.在汲取液體時(shí),要用量程和需要量挨近的槍去吸,削減誤差。
4.必須做雙孔試驗(yàn),這樣才既能確保數(shù)據(jù)的精確性,又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并常常校正其精確性。
6.為避免樣品蒸騰,試驗(yàn)時(shí)將反響板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
7.未運(yùn)用完的酶標(biāo)板或許試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶符號(hào)抗人IgG工作液請(qǐng)根據(jù)所需的量裝備運(yùn)用。請(qǐng)勿重復(fù)運(yùn)用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶符號(hào)抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒試驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按闡明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)刻,避免孵育時(shí)刻人為延伸,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反響孔周圍,難以清洗。
9.剩下樣品及拋棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后拋棄。
10.ELISA試劑盒洗刷時(shí)各孔均需加滿液體,避免孔口有游離酶不能洗凈。
11.每次試驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。丈量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
12.手工洗板時(shí)每次參加洗刷液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗刷液濺入另一酶標(biāo)孔中,避免穿插污染。甩去洗刷液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13.對(duì)樣本的結(jié)果有疑問(wèn)時(shí)需要運(yùn)用其他檢測(cè)辦法進(jìn)行驗(yàn)證。
14.沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí),可以運(yùn)用娃哈哈純凈水制造溶液,切勿運(yùn)用自來(lái)水。
15.在運(yùn)用微量加樣器時(shí),汲取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即便汲取規(guī)范品溶液。
16.汲取液體時(shí)速度不易太快,避免發(fā)生氣泡,人ELISA試劑盒汲取的量不夠精確。
17.汲取液體時(shí)要選用量程和需要量挨近的微量加樣器吸,削減誤差。
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