沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)中血清學(xué)試驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題解答
沙門(mén)氏菌的理化性質(zhì):生化反應(yīng)很活潑,能分解多種糖類(lèi)和醇。
培養(yǎng)特性
1)需氧及兼性厭氧菌。
2)在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,培養(yǎng)24h后,形成中等大小、圓形、表面光滑、無(wú)色半透明、邊緣整齊的菌落,其菌落特征亦與大腸桿菌相似(無(wú)糞臭味)。
3)鑒別培養(yǎng)基(麥康凱、SS、伊紅美藍(lán)):一般無(wú)色菌落。
4)三糖鐵瓊脂斜面:斜面為紅色,底部變黑并產(chǎn)氣 。
生化特性
1)發(fā)酵葡萄糖,麥芽糖,甘露醇和山梨醇產(chǎn)氣;
2)不發(fā)酵乳糖、蔗糖和側(cè)金盞花醇;
3)不產(chǎn)吲哚、V-P反應(yīng)陰性;
4)不水解尿素和對(duì)苯丙氨酸不脫氨。
傷寒沙門(mén)氏菌、雞傷寒沙門(mén)氏菌及一部分雞白痢沙門(mén)氏菌發(fā)酵糖不產(chǎn)氣,大多數(shù)雞白痢沙門(mén)氏菌不發(fā)酵麥芽糖;除雞白痢沙門(mén)氏菌、豬傷寒沙門(mén)氏菌、甲型副傷寒沙門(mén)氏菌、傷寒沙門(mén)氏菌和仙臺(tái)沙門(mén)氏菌等外,均能利用枸櫞酸鹽。
血清學(xué)特性
沙門(mén)氏菌具有復(fù)雜的抗原結(jié)構(gòu),一般沙門(mén)氏菌具有菌體(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面抗原(莢膜或包膜抗原)三種抗原。
沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)中血清學(xué)試驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題
1、沙門(mén)氏菌判定時(shí)以生化試驗(yàn)結(jié)果為主還是血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果為主?
我們?cè)谂卸〞r(shí)應(yīng)該以生化試驗(yàn)結(jié)果為主,在生化試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行血清學(xué)判定。有的試驗(yàn)人員會(huì)直接用多價(jià)血清進(jìn)行試驗(yàn),不進(jìn)行生化試驗(yàn),這是絕對(duì)不可取的。因?yàn)檠鍖W(xué)的原理是抗原抗體結(jié)合,非沙門(mén)氏菌的微生物也有可能帶有沙門(mén)的類(lèi)似抗原的。所以我們做鑒定的時(shí)候,必須先進(jìn)行生化試驗(yàn),在生化試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行血清學(xué)鑒定。
2、血清學(xué)試驗(yàn)要做到什么程度?
如果我們只需要鑒定某個(gè)菌株是否屬于沙門(mén)氏菌,那只需要做O多價(jià)和H多價(jià)血清就可以了。如果需要鑒定某個(gè)菌株具體是什么沙門(mén)氏菌,比如是否為鼠傷寒沙門(mén)氏菌或是否為腸炎沙門(mén)氏菌,那就需要進(jìn)行血清學(xué)分型試驗(yàn),從多價(jià)血清一直做到O抗原和H抗原的單因子,然后參照GB
3、O多價(jià)血清不凝集,就一定是O抗原陰性么?
我們?cè)谧鯫多價(jià)血清時(shí),如果沒(méi)有凝集并不能直接判定為陰性,因?yàn)槲覀冞€要考慮Vi抗原的影響。Vi抗原屬于K抗原群,是會(huì)阻隔O抗原和相應(yīng)抗體的結(jié)合,所以有Vi抗原存在時(shí),O多價(jià)血清是不會(huì)凝集的。GB
4789.4-2010沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中提到已知具有Vi抗原的菌型有:傷寒沙門(mén)氏菌、丙型副傷寒沙門(mén)氏菌和都柏林沙門(mén)氏菌。因此,我們必須去除Vi抗原的影響。具體方法是將待檢菌做成濃菌液,放入100℃沸水中煮沸15-60分鐘,目的是破壞Vi抗原,然后再挑取菌液做O多價(jià)血清。如果還是不凝集,才能判定為陰性。
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