細胞培養(yǎng)是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環(huán)境下,使其生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養(yǎng)技術。細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)物可以是單個細胞,也可以是細胞群。細胞生存基本條件有環(huán)境、溫度、氣體環(huán)境和氫離子濃度、基本營養(yǎng)物質、促生長因子、激素、滲透壓等因素。下面給大家講解細胞生存環(huán)境和代謝。
一、無污染環(huán)境
無菌、無毒是保證細胞生存的首要條件。保證細胞生存環(huán)境無任何污染、代謝物及時清除,是維持細胞生存的基本條件。
二、溫度:35~37℃
人哺乳動物:36.5℃±0.5℃;
鳥類:38.5℃;
培養(yǎng)細胞對低溫耐受力比高溫強;溫度上升不超過39℃時,細胞代謝強度與溫度成正比。
39~40℃1小時,受損傷的細胞可能恢復;
41~42℃1小時,嚴重損傷,個別細胞恢復;
43℃以上1小時,細胞全部死亡;
溫度不低于0℃時,細胞代謝有影響,無傷害作用;
置于 25~35℃,細胞能生存,但生長速度減慢;
放在 4℃ 數小時;再放回 37℃ 細胞仍繼續(xù)生長。
細胞代謝隨溫度降低而緩慢,溫度降至冰點以下時,細胞因胞質結冰受損而死亡。
在培養(yǎng)液中加一定量保護劑(二甲基亞砜或甘油),封入安瓿中后,凍于液氮中,- 196℃,能長期貯存,解凍后細胞復蘇,仍能繼續(xù)生長,細胞的生物性狀不受任何影響,此為細胞保存的主要手段。
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