雙熒光素酶
DLA是指螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶,螢火蟲熒光素酶呈黃綠色,波長550-570nm,海腎熒光素酶呈藍色,波長為480nm。報告基因?qū)嶒炇菍袠藛幼拥奶囟ㄆ尾迦霟晒馑孛副磉_序列的前方,構(gòu)建帶有靶標啟動子片段的雙報道基因質(zhì)粒,然后將待測的轉(zhuǎn)錄因子表達質(zhì)粒與報告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293細胞或者其他相關(guān)細胞系,如果轉(zhuǎn)錄因子能夠激活啟動子,則報告基因表達,熒光素酶的表達量與轉(zhuǎn)錄因子作用強度成正比。加入熒光素酶底物即可根據(jù)熒光強度檢測轉(zhuǎn)錄因子與靶啟動子之間是否存在相互作用。熒光素酶報告基因可構(gòu)建在同一質(zhì)?;蛘邩?gòu)建為兩個質(zhì)粒,即轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒與靶啟動子片段質(zhì)粒。
結(jié)果展示
實驗完成周期及交付標準
實驗周期:4-6周
交付標準:雙熒光素酶報告基因檢測、鑒定結(jié)果報告、分析報告、實驗報告(試劑、耗材、實驗步驟)、原始數(shù)據(jù)等
需確認的信息
1. 基因與啟動子信息
2. 具體分許信息
3. 是否提供質(zhì)粒
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