近些年的體外診斷，接連遇到分子診斷和POCT即時(shí)診斷兩個(gè)重要風(fēng)口，凍干形式的分子診斷試劑在全球受到了越來(lái)越多的應(yīng)用。凍干關(guān)鍵原料的選擇和研制，影響體外診斷試劑各個(gè)項(xiàng)目的性能水平和應(yīng)用價(jià)值，篩選到合適的原料是最重要的研發(fā)工作，也是診斷試劑成本構(gòu)成的最主要部分。

凍干試劑的研發(fā)包括原料與輔料的選擇、研發(fā)工藝與設(shè)備的選擇等，由于各個(gè)領(lǐng)域交叉相互干擾，研發(fā)周期可能會(huì)失控。以凍干原料篩選過(guò)程為例，凍干原料的篩選涉及原酶開(kāi)發(fā)、原酶篩選、試劑開(kāi)發(fā)、凍干打樣測(cè)試等環(huán)節(jié)。具體篩選過(guò)程如下圖所示：

圖1.凍干原料篩選過(guò)程

那如何能夠快速研發(fā)出分子診斷凍干試劑呢？

可以考慮市面上用標(biāo)準(zhǔn)引物探針測(cè)試過(guò)凍干前后性能均穩(wěn)定的試劑原料、凍干保護(hù)劑，參考凍干工藝，再搭配具體項(xiàng)目的引物探針進(jìn)行測(cè)試，若測(cè)試通過(guò)則可以安排全體系凍干微芯打樣實(shí)驗(yàn)，并測(cè)試性能，性能通過(guò)即可轉(zhuǎn)產(chǎn)放大，若測(cè)試不通過(guò)則可以與原料廠家進(jìn)行定制化的優(yōu)化調(diào)試。

翌圣生物作為深耕于上游生命科學(xué)領(lǐng)域酶制劑的供應(yīng)商，長(zhǎng)期為IVD公司提供高品質(zhì)、高性價(jià)比的原料酶。且可為客戶提供定制優(yōu)化服務(wù)，盡可能縮短凍干試劑的研發(fā)周期。

Hifair® Lyo Multiplex One Step RT-qPCR Kit（Cat#11831）

該原料含有基因改造的雙封閉抗體封閉的Taq酶及深度優(yōu)化的多重反應(yīng)緩沖體系，可極大地提高擴(kuò)增靈敏度和特異性。由4×buffer、酶mix及凍干保護(hù)劑三個(gè)組分組成，便于液體版各組分體系微調(diào)。既可作為液體試劑直接使用，同時(shí)匹配凍干保護(hù)劑，可以直接用于凍干，進(jìn)行凍干產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)。

圖2. 使用Yeasen的RNA可凍干試劑（Cat#11831ES）分別進(jìn)行原位凍干和凍干微芯，觀察凍干產(chǎn)品的凍干形態(tài)：凍干后凍干形態(tài)良好，原位凍干表面無(wú)塌陷，管內(nèi)無(wú)空隙；凍干球形態(tài)飽滿圓滑，大小均一。

圖3.使用Yeasen的RNA可凍干試劑（Cat#11831ES）凍干成凍干微芯后，在不同條件下（正常保存為T0時(shí)刻，50℃加速14天及25天）進(jìn)行處理，同時(shí)擴(kuò)增105 、104、103 copies/mL的新冠假病毒模板，結(jié)果顯示：凍干微芯熱加速前后Ct值、熒光值、球形等均無(wú)顯著變化，凍干產(chǎn)品穩(wěn)定性良好。

圖4.使用Yeasen的RNA可凍干試劑（Catt#11831ES）凍干成凍干微芯后，進(jìn)行熱加速處理，同時(shí)使用普通程序和超快速程序檢測(cè)IVA、IVB 及內(nèi)參模板，兩者Ct值、熒光值無(wú)顯著差異。由此可見(jiàn)：11831 ES凍干微芯T0時(shí)刻及熱加速后的產(chǎn)品，兼容常規(guī)程序和快速程序，性能穩(wěn)定。