細胞克隆形成實驗是用來檢測細胞增殖能力、侵襲性、對殺傷因素敏感性等項目的重要技術方法。那么你知道細胞克隆的原理與分類嗎?讓我們一起來看看吧!
一、原理
當單個細胞在體外增殖6代以上,其后代所組成的細胞群體,成為集落或克隆。其中細胞克隆形成率即細胞接種存活率,表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數量。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。
二、克隆形成的目的
1)檢測細胞經干預處理后的克隆形成能力來判斷干預后是否影響細胞的增殖和存活能力;
2)評價不同殺傷因素(藥物、基因等)對腫瘤細胞增殖能力或群體依賴性的敏感性;
3)評價細胞在體內成瘤性:腫瘤細胞不一定都可以在體內成瘤,若體外克隆能力越強,即表明體內成瘤性越強,算是一種模擬體內成瘤的體外實驗。
三、克隆形成依據采用的培養(yǎng)介質的不同,分為平板克隆和軟瓊脂克隆兩類
1. 平板克隆形成(Colony formation):細胞培養(yǎng)在培養(yǎng)基中,應用于貼壁的細胞。
2. 軟瓊脂克隆形成(soft agar colony formation):細胞被瓊脂糖掛起來,主要應用于懸浮的腫瘤細胞和轉化細胞系。
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