甘油三酯(Triglyceride,TG)是3分子長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子。甘油三酯是人體內(nèi)含量最多的脂類,大部分組織均可以利用甘油三酯分解產(chǎn)物供給能量,同時肝臟、脂肪等組織還可以進行甘油三酯的合成,在脂肪組織中貯存。人血清中甘油三酯水平呈明顯正偏態(tài)分布。
用脂蛋白酯酶(LPL)使血清中的甘油三酯(TG)水解成甘油與脂肪酸,將生成的甘油用甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)磷酸化。以磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化3-磷酸甘油(G-3-P),然后以過氧化物酶(POD),4-氨基安替比林(4-AAP)與4-氯酚(三者合稱PAP)反應顯色,在特定波長處監(jiān)測吸光度值,可計算甘油三酯含量。
甘油三酯 (TG) 檢測試劑盒使用方法:
樣品處理:將待測樣品(血清、血漿等)離心分離,收集上清液。
反應體制:將收集的上清液與甘油三酯比色法檢測試劑盒中的試劑按比例混合,充分混勻。
比色反應:將混合后的試劑體系孵育于適當?shù)臏囟认?,一定時間后,使用分光光度計測量吸光度。
甘油三酯 (TG) 檢測試劑盒應用領域:
甘油三酯比色法檢測試劑盒廣泛應用于臨床實驗室、醫(yī)學研究和生物技術領域。其主要應用包括:
心血管疾病風險評估:甘油三酯水平與心血管疾病的發(fā)生風險密切相關,通過檢測甘油三酯濃度可以評估患者的心血管健康狀況。
肥胖與代謝疾病研究:甘油三酯作為能量儲備物質(zhì),在肥胖和代謝疾病的研究中起到重要作用,檢測甘油三酯水平有助于了解相關疾病的發(fā)生機制。
藥物研發(fā)和藥效評估:甘油三酯比色法檢測試劑盒可以用于藥物研發(fā)過程中藥效的評估,特別是針對調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的藥物。
艾美捷EZMeta™ 甘油三酯(TG)比色法檢測試劑盒:
產(chǎn)品編號:D-AKC2200
規(guī)格:48T / 96T
儲存條件:儲存在4°C下,避免光照,保存期為6個月
適用樣品:血清、血漿、動植物組織、細胞、細胞上清液、細菌
甘油三酯 (TG) 檢測試劑盒樣品制備:
注意:建議使用新鮮樣品。如果不能立即檢測,樣品可以在-80°C下儲存一個月。
1. 動物組織:稱取0.1克組織,加入1毫升提取緩沖液,在冰上均質(zhì)。以4°C下8000g離心10分鐘。使用上清液進行測定,并將其放在冰上待測。
2. 植物組織:稱取0.1克組織,加入1毫升提取緩沖液并研磨。在冰浴中超聲處理5分鐘(功率20%或200瓦,超聲3秒,間隔7秒,重復30次)。以4°C下8000g離心10分鐘。使用上清液進行測定,并將其放在冰上待測。
3. 細胞或細菌:收集5 x 10^6個細胞或細菌放入離心管中,用冷PBS洗滌細胞或細菌,離心后去除上清液;加入1毫升提取緩沖液超聲破碎細胞或細菌5分鐘(功率20%或200瓦,超聲3秒,間隔7秒,重復30次)。以4°C下8000g離心10分鐘。使用上清液進行測定,并將其放在冰上待測。
4. 血清、血漿、細胞上清液或其他液體樣品:直接將樣品加入微孔板中進行測試。
注意:如果通過蛋白質(zhì)濃度計算TG含量,最好使用EZMeta™甘油三酯(TG)比色法檢測試劑盒對總蛋白進行定量。
數(shù)據(jù)分析:
注意:我們?yōu)槟峁┝擞嬎愎剑ㄍ茖н^程和最終公式。這兩者完-全相等。建議使用粗體的簡潔計算公式作為最終公式。
1. 液體樣品中TG濃度的計算:
TG(mg/dL)=100×CStandard×(ATest-ABlank)÷(AStandard-ABlank)=100×(ATest-ABlank)÷(AStandard-ABlank)
2. 動植物組織中TG濃度的計算:
(1)根據(jù)蛋白質(zhì)濃度計算
TG(mg/mg蛋白質(zhì))=CStandard×V×(ATest-ABlank)÷(AStandard-ABlank)÷(Cpr×V)=(ATest-ABlank)÷(AStandard-ABlank)÷Cpr
(2)根據(jù)樣品的鮮重計算
TG(mg/g鮮重)=CStandard×V×(ATest-ABlank)÷(AStandard-ABlank)÷W=(ATest-ABlank)÷(AStandard-ABlank)÷W
3. 細胞或細菌中TG濃度的計算:
TG(mg/10^4)=CStandard×(ATest-ABlank)÷(AStandard-ABlank)÷500=(ATest-ABlank)÷(AStandard-ABlank)÷500
其中:CStandard為1 mg/mL;100表示1 dL等于100 mL;Cpr為樣品的蛋白質(zhì)濃度,單位為mg/mL;W為樣品的重量,單位為g;V為加入提取緩沖液的樣品制備體積,為1 mL;500表示細胞或細菌的總數(shù),為5×10^6。
該試劑僅用于科學研究領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
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