千種細(xì)胞系列(三) |A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549來(lái)源于58歲的白人男性肺癌組織,由D.J. Giard等人建立于1972年。M. Lieber發(fā)現(xiàn)A549可以通過(guò)胞苷二磷酸膽堿途徑合成高比例的不飽和脂肪酸卵磷脂。該細(xì)胞復(fù)蘇后不耐低溫和長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)輸,復(fù)蘇后沿途低溫度需高于10攝氏度且運(yùn)輸路途不可過(guò)長(zhǎng)。冬天常溫郵寄A549細(xì)胞時(shí)會(huì)有細(xì)胞脫落、壞死等現(xiàn)象,請(qǐng)盡量選用干冰冷鏈快遞。
細(xì)胞信息:
貨號(hào) :ZQ0003
種屬 :人
組織 :肺
疾病 :癌
細(xì)胞類(lèi)型:上皮
形態(tài)學(xué):上皮樣
生長(zhǎng)方式:貼壁
培養(yǎng)基:F-12K基礎(chǔ)培養(yǎng)基( 貨號(hào):ZQ-599 )
推薦完培養(yǎng)基:ZM0003
培養(yǎng)條件:95%空氣,5%二氧化碳;37℃
細(xì)胞特點(diǎn):
1、低溫保存的細(xì)胞非常脆弱,請(qǐng)將凍存管放入 37℃的水浴中解凍,盡快復(fù)蘇細(xì)胞。
2、提前室溫預(yù)熱培養(yǎng)基。
3、觀察細(xì)胞密度建議用(4X 物鏡)低倍鏡觀察,以便正確的判斷細(xì)胞密度;觀察細(xì)
胞形態(tài)請(qǐng)用(10X 或 20X)高倍鏡觀察;
4、 推薦使用 0.25%胰酶/EDTA 消化液;
5、 瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用,請(qǐng)換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng);
6、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心重懸后接種到新瓶?jī)?nèi)。
常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案
1、在收到細(xì)胞后先觀察培養(yǎng)瓶是否破裂,漏液等,如遇到上述問(wèn)題請(qǐng)及時(shí)拍照并與我們
聯(lián)系。
2、.貼壁細(xì)胞:培養(yǎng)瓶不開(kāi)封,顯微鏡下檢查細(xì)胞狀態(tài),瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)
箱。1-2 小時(shí)后觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余少量漂浮的細(xì)
胞可以去掉,留 8-10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度到達(dá) 85%左右,進(jìn)行消化傳
代;如細(xì)胞仍不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),
注意觀察。如細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力,并請(qǐng)及時(shí)拍照(多倍數(shù)
多視野),包括染色照片,并聯(lián)系我們。(以上僅為貼壁細(xì)胞處理方法)
3、.懸浮細(xì)胞:培養(yǎng)瓶不開(kāi)封,顯微鏡下檢查細(xì)胞狀態(tài),瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)
箱。1-2 小時(shí)后觀察,將整瓶細(xì)胞及培養(yǎng)液分批離心(1000rmp, 5min),加入適量培養(yǎng)
基,根據(jù)離心后的細(xì)胞量進(jìn)行放回培養(yǎng)或分瓶培養(yǎng)。(以上僅為懸浮細(xì)胞處理方法)
4、半懸細(xì)胞:培養(yǎng)瓶不開(kāi)封,顯微鏡下檢查細(xì)胞狀態(tài),瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)
箱。1-2 小時(shí)后觀察,將整瓶細(xì)胞培養(yǎng)液上層懸浮細(xì)胞離心(1000rmp, 5min),重懸細(xì)
胞后加入原培養(yǎng)瓶培養(yǎng)至傳代。細(xì)胞數(shù)量較大,可將貼壁細(xì)胞消化下來(lái),與上層懸浮細(xì)
胞混勻傳代。重懸上層懸浮細(xì)胞時(shí)必須保持下層貼壁細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)條件,防止貼壁細(xì)胞缺
乏營(yíng)養(yǎng)。(以上僅為半懸細(xì)胞處理方法)
如遇到細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題請(qǐng)及時(shí)拍照并與我們聯(lián)系,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)。
企業(yè)介紹
上海中喬新舟生物科技有限公司成立于2011年,是一家專(zhuān)業(yè)從事研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)的生物醫(yī)藥高科技企業(yè)。企業(yè)依托上海交通大學(xué)、同濟(jì)大學(xué)等上海地區(qū)多家高校,擁有一支科研實(shí)力雄厚且經(jīng)驗(yàn)豐富的開(kāi)發(fā)團(tuán)隊(duì)。現(xiàn)有細(xì)胞株(系)、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完培養(yǎng)基、特殊培養(yǎng)基)、細(xì)胞培養(yǎng)試劑、血清、因子、試劑盒等品種豐富的自主研發(fā)產(chǎn)品。
企業(yè)所有產(chǎn)品在開(kāi)始的研發(fā)、生產(chǎn)、質(zhì)檢和質(zhì)控上一直對(duì)標(biāo)國(guó)際品牌,已經(jīng)為產(chǎn)品進(jìn)入國(guó)際市場(chǎng)做好充分的準(zhǔn)備。
公司致力于成長(zhǎng)為專(zhuān)業(yè)細(xì)胞系及原代細(xì)胞培養(yǎng)供應(yīng)商、專(zhuān)業(yè)細(xì)胞培養(yǎng)基及培養(yǎng)試劑生產(chǎn)商。
目前產(chǎn)品已經(jīng)銷(xiāo)售30個(gè)多省市,在多地建立了穩(wěn)定的銷(xiāo)售渠道,我們的目標(biāo)是與客戶(hù)建立長(zhǎng)期的合作伙伴關(guān)系,共同實(shí)現(xiàn)成功。選擇我們,我們將成為您信賴(lài)的合作伙伴,共同邁向成功的未來(lái)!
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