AP-TAG 技術改變了細胞表面受體和配體的檢測和克隆方式。本發(fā)明的本質(zhì)是允許編碼受體的任何分泌性多肽配體或胞外結構域的cDNA序列符合讀碼框地融合至pAPtag克隆載體中的人胎盤分泌性堿性磷酸酶(AP)。所得配體-AP 融合蛋白(稱為 AP-body)在 293T 或 CHO 細胞中表達時,可以高水平分泌到培養(yǎng)基中,因此可以通過 AP 活性測定或使用抗 AP 抗體的蛋白質(zhì)印跡分析輕松檢測到。因此,配體-AP或可溶性受體-AP融合蛋白可以像抗體一樣充當親和劑,從而可以方便、安全和靈敏地檢測和克隆其相應的細胞表面受體或配體。與傳統(tǒng)的放射性125I標記方法不同,AP-TAG是安全的,不需要配體/可溶性受體純化。
自發(fā)明以來,AP-TAG技術已克隆了許多重要的細胞表面受體和配體,包括Leptin、Semaphorin III、Nogo-66、IL-24、Jelly Belly的受體以及Kit、Mek4和Sek受體酪氨酸激酶的配體。
如果您正在使用通過 DD 或其他方法克隆的分泌蛋白或細胞表面分子,AP-TAG 技術可以讓您進一步對這些基因進行功能表征。
AP-TAG Kit B
用于受體/配體相互作用的非放射性檢測。
這種單向量系統(tǒng)是第三代AP-TAG技術。分泌型配體或可溶性受體可以與分泌型堿性磷酸酶(AP)在其N端或C端融合以產(chǎn)生“AP體”。所得的 AP 融合蛋白可以作為分泌蛋白表達,并直接用作高度敏感的親和劑,就像抗體一樣。表位標簽(6xHis 和 myc)可以輕松純化、檢測和相互作用測定 (IP) AP 融合蛋白。下面列出了其他改進的功能。
AP-TAG Kit A
用于受體/配體相互作用的非放射性檢測。
這是使用 pAPtag-2 和 pAPtag-4 載體的第二代 AP-TAG 技術。分泌型配體或可溶性受體可以與分泌型堿性磷酸酶(AP)在其N端或C端融合以產(chǎn)生“AP體”。所得的 AP 融合蛋白可以作為分泌蛋白表達,并直接用作高度敏感的親和劑,就像抗體一樣。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。