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培養(yǎng)液pH下降很快的可能原因分析

來源:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司   2024年02月22日 10:11  

  通常細(xì)胞生長得非??鞎r(shí),pH值通常下降得很快。此時(shí)可以及時(shí)傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進(jìn)行解決。此外,培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊、NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細(xì)菌、酵母或真菌污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。

  (1)按培養(yǎng)液中NaHCO3 濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2 濃度,2.0g/L 到3.7g/L 濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5%到10%。

 ?。?)改用不依賴CO2培養(yǎng)液。

  (3)松開瓶蓋1/4 圈。加HEPES 緩沖液至10 到25mM終濃度。

  (4)在CO2 培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle′s 鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks 鹽配制的培養(yǎng)液。

 ?。?)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。

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